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鸭新城疫病毒的离鉴定及其致病性研究

摘要 disease, 1997年,我国广东和江苏两省的家养水禽(鹅)暴发了新城疫(Newcastle ND),从而改变了致病性新城疫病毒(Newcastledisease virus,NDV)对水禽不致病 之说。但2000年以来,由NDV引起的鸭的l临诊感染在浙江、江苏、山东、河北等 省日趋增多。因此鸭ND的发生预示着重要的流行病学和病原生态学意义。虽然已有 部分学者对鸭ND进行了研究,但有关本病病原的生物学特性及来源等问题仍亟待解 生物学特性和病理学研究,进一步表明我国部分地区鸭群中已存在对鸭和鸡等禽类具 有较强致病性的NDV。 l、鸭NDV HB/I/0$/Dk株的分离鉴定及生物学特性研究 从患病鸭群中分离到一株致雏鸭腹泻、腺胃黏膜局灶性出血或溃疡、肠道黏膜出 血并致雏鸭严重死亡的病毒,编号为HB/l,05/Dk。纯化的病毒在透射电镜下囊膜表 面有纤突,血清学试验结果表明该病毒具有血凝活性,可被ND标准阳性血清所抑 制,但不能被禽流感(Avian death 抑制。对该病毒的毒力进行测定,结果其鸡胚平均死亡时间(Mean time,MDT) 表明该病毒属强毒株。人工感染结果显示该病毒对雏鸭和雏鸡有高度的致病性。电镜 观察、血清学、理化鉴定及致病指数的测定等结果均表明HB/I/05/Dk为一株对鸭和 鸡具有高致病力的NDv. 2、鸭NDV体内外致病变特性 对体内感染组织和体外细胞培养物的致病变特性。 在体内试验中,对部分人工感染鸭包括气管、肺、腺胃等在内的20种器官的大体 病变和组织病变进行了观察,并对病毒抗原在各种组织中的分布进行了检测。结果感 染鸭多种组织器官都表现明显的大体病变和组织学变化,其中消化器官、呼吸器官和 部分免疫器官尤为严重,大体病变主要表现为肠道黏膜出血或坏死,胸腺出血,胰腺 和脾脏的轻微坏死,组织学变化特征为各种上皮细胞及淋巴细胞显著的变性、坏死。 免疫组化(immunohistochemical staimng,IHC)检测表明,感染后可以在除脑、心肌、 十二指肠、脾脏之外的各种组织中检测到病毒抗原;病毒抗原主要存在于各种上皮细 胞以及肝细胞、网状细胞的胞浆内。结合免疫组化染色强度、病毒引起相应组织病变 的严重程度进行比较发现,鸭源NDV可以在感染鸭的多种组织细胞中复制,导致广 泛的组织损伤。 在体外试验中,研究了鸭源NDV在鸡胚成纤维细胞(Chiekellflbroblast, embryo CEF)培养物上的致病变特性,并将其与鸡源NDV、鹅源NDV的相应特性进行了比 病变产生,最初各种毒株导致的病变相似,表现为细胞变圆、皱缩、折光性增强,但 鸭源和鹅源毒株感染的细胞单层病变进展缓慢,表现为细胞逐渐地变圆、浮起、崩解, 并伴有大量合胞体形成;在96h单层破坏、消失。而鸡源毒株接种的细胞单层病变进 展迅速,在60-108h即见单层即彻底破坏。对各株病毒接种后不同时间培养上清HA 效价的测定结果表明,鸭NDVHB/I/05/Dk株在96h达到峰值(4 l092):鸡源NDV JS/I/97/Go株在接 l092);而鹅源NDV QH.1/79、F4sE8株在84--108h达到峰值(3-4 种后96h达到峰值,但峰值仅为3l092。 fibroblast, 鸭源NDV、鸡源NDV及鹅源NDV感染鸭胚成纤维细胞(Duck

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