人突变cd59白的提取纯化与单克隆抗体的制备.pdfVIP

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2016-03-09 发布于贵州
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人突变cd59白的提取纯化与单克隆抗体的制备.pdf

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人突变cd59白的提取纯化与单克隆抗体的制备

人突变CD59蛋白的提取纯化与单克隆抗体的制备中文摘要型：利用ANTI．FLAGM2亲和层析的方法提取纯化hmCD59重组蛋白；以纯化的终设计出阻抗hmCD59单克隆抗体为基础的诊断与治疗措捕打下坚实的理论基础为糖尿病血管并发症的研究提供新的思路与手段· 出抗性克隆；采用免疫荧光技术筛选转染细胞阳性克隆；不连续聚丙烯酰胺凝胶电 M2 blot)和酶联免 afbmitygel亲和层析纯化，以SDS、免疫印迹法(Western 小鼠，分别制各抗hmCD59的多克隆及单克隆抗体，ELISA法检测抗体效价及免疫学活性。 M2 r蛋白浓度为 affinity 型；经ANTI．FLAG gel亲和层析获得电泳纯的hmCD59 0．6mg／ml，Western 过淋巴细胞杂交瘤技术获得1株分泌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其培养上清效价为1：16。组hmCD59在CHO细胞表面稳定表达：亲和层析法可以获得电泳纯并具有免疫学体，为抗hmCD59抗体的功能研究及临床应用奠定了基础· 关键词：基因转染；ClIO细胞；真核表达：亲和层析；多克隆抗体；单克隆抗体 PurificationofHumanMutantCD59Proteinand of Preparation Monoclonal Antibody Abstract To CHO transfeeted establisha cellmodel Objective recombinantplasmid．Topuffy M2 andmonoelonal atfinityehmraatography．Top1印∽thepolyelonal antilⅫtyagainst hmCD59immunizeBalb／emicewith hmCD59 by recombinant purified protein．Provide the for and lneaslⅡesbased011 theoreticbasis the stability diagnostic devising therapeutic theanti-∽D59monoclonal to IleW forfurther antibody．Helpsupplythought studying ofvascular ofdiabetes． proliferativecomplications MethodsThe recombinantPALTER-MAX htananmula／ltCD59 pj∞mid containing and wereco-transfcet