儿童血液肿瘤与o-1基因关系的研究.pdf

目 录 中文摘要……………………………………………………………………1 英文摘要……………………………………………………………………5 研究论文儿童血液肿瘤与Zo_1基因关系的研究 ”一一””……”一。ll 前言··……··…··…………···························000······…·……·····11 刚看”……”…”“………”””一””一””一”””” 材料与方法……………………………………………………………12 结果···……······……···………············…···············…············19 附I虱··············································································23 附表…………………………………………………………………···30 讨论··············································································35 结论·······························-········································…···38 参考文献………………………………………………………………39 综述ZO．1基因甲基化与血液肿瘤………………………………………42 致谢···…··………………···……………………···………····…·······…··56 个人简历……………………………………………………………………57 中文摘要 儿童血液肿瘤与Z0-1基因关系的研究 摘 要 目的：随着医学的发展，严重威胁儿童的急性感染性疾病的发病率 与死亡率已大幅下降，而恶性肿瘤已成为威胁儿童生命的主要疾病之一， 其中血液肿瘤占绝大多数，且发病率有逐年增高之势。由于病因不明确， 早期发现、对因治疗受到限制，目前已成为儿童的主要杀手。化疗仍是 其治疗的主要手段，近年来由于化疗方案的不断改进，长期生存率也有 所升高，但仍有部分患儿不能缓解或复发。因而探索病因、寻求一种更 为有效的防治措施对改善患儿的预后和生活质量具有十分重要的意义。 DNA甲基化是表观遗传修饰的重要组成部分，甲基化修饰异常在血液肿 瘤发生、发展中扮演重要角色。特异基因的异常甲基化可作为血液肿瘤 occludens) 的分子标志物，在临床用于观察疗效及治疗靶标。ZO．1(zonula 基因所表达的是一种紧密连接蛋白，是膜相关鸟苷酸激酶家族成员之一， 是维持细胞结构完整和正常极性的必需蛋白，在细胞连接及信号传导中 起重要作用，参与调控细胞的增殖与分化。近年有学者应用RLGS技术首 次在鼠白血病细胞中发现ZO．1基因启动子区呈现高甲基化状态，导致该 基因表达受抑，提示ZO．1可能是一个白血病相关基因。但目前国内外尚 无该基因在儿童血液肿瘤中的相关研究报道。本实验通过检测血液肿瘤 患儿骨髓ZO．1基因甲基化情况，以探讨其在儿童血液肿瘤发生、发展中 的作用，旨在寻找新的儿童血液肿瘤分子标志物，为临床提供早期诊断、 疗效判定、预后分析、微小残留病检测及靶向治疗的理论和实验依据。 方法：将确诊为白血病[急性淋巴细胞性白血病(ALL)，急性髓细 前期、化疗中期、化疗后期、临床缓解以及复发病例的骨髓标本作为研 究组，非血液肿瘤患儿骨髓作为对照组。采用甲基化特异性聚合酶链反 应(MS．PCR)方法，分别检测研究组与对照组患儿骨髓中ZO．1基因的甲 基化状态，逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测研究组与对照组ZO．1 中文摘要 ． 条带进行凝胶成像系统荧光强度半定量分析的荧光强度积分值(IOD 值)，观察研究组化疗过程中IOD的动态变化，并与外周血白细胞数及骨 髓中恶