人骨髓间充质干胞体外诱导分化为角膜缘干细胞的研究.pdf

摘要 摘 要 bone 目的：探讨体外诱导人骨髓间充质干细胞(HBMSCs，human mesenchymal stem stem cells)分化为角膜缘干细胞(LSCs，limbalcells)的可行性。 bovine 培养基中扩增培养，流式细胞仪检测细胞的核心抗原P63。将第四次传代的 X HBMSCs按5 X 组：实验组将第二次传代的LSCs按5104／ml接种于Transwell培养板上层， 12，IO％FBS，1 用一种特殊的培养基(含90％LG．DMEM／F 0ng／ml 0I，tg／mlEGF,1 培养基培养。在相差显微镜下进行形态学观察。 长，呈长梭形，漩涡状盘旋排列。流式细胞分析结果显示第四代HBMSCs表达 相关的抗原标记 CD1 CD29(96．78％)，CD44(96．23％)，05(91．45％)， 要组织相容性抗原HLA．DR(1．11％)。在体外成功培养出LSCs，细胞呈圆形、 椭圆形、多角形，胞体透亮，约2周后细胞融合呈镶嵌状排列。第二代LSCs 圆形改变，在体外微环境中诱导lO天后大部分细胞呈多边形、圆形、椭圆形， 少量细胞呈梭形。对照组细胞呈典型HBMSCs贴壁生长，以长梭形为主。试验 组P63弱阳性(7．16士0．56％)，对照组P63阴性(0．74+0．49％)。 能力。 关键词：骨髓间充质干细胞；角膜缘干细胞；共培养：分化 Il Abstract ABSTRACT the ofhumanbonemarrow Objective：To ofdifferentiation explorefeasibility stemcellintoilmbal invitro． mesenchymal stemcells Methods：HumanbonemalTow stemcellswereisolated derived mesenchy7mal by andculturedinatotalmediumwithLG-DMEM／F12 gradientdensitycentrifugation 10％FBS．cell weredetectedflow stem containing phenotype by cytometry．1imbal cellswereharvestedtissuecultivationafter andculturedinamedium by digestion 12 晰t11HG-DMEM／F