以糙米为原料流加L-蛋氨酸的S-腺苷蛋氨酸发酵优化.pdfVIP

第41卷第1期 工业微生物 Vd．41No．1 2011年02月 Industrial F如．2011 Microbiology doi：10．3969／j．issn．1001—6678．2011．01．007 以糙米为原料流加L一蛋氨酸的S一腺苷蛋氨酸发酵优化 汪文俊 (生物技术国家民委重点实验室，微生物与生物转化中南民族大学重点实验室， 中南民族大学生命科学学院，武汉430074) 摘 要：研究了S．腺苷甲硫氨酸(S枷)高产茵啤酒酵母S-W55的廉价培养基及分批补料发酵过 程优化。对啤酒酵母S-W55生长和SAM产量影响最为重要的糙米水解糖和酵母粉进行了响应面 优化，得到了最优化的配方为糙米水解糖51．4 g／L、酵母粉4．74g]L，此条件下啤酒酵母S-W55的 SAM产量达2．61彰L。不同分批补料发酵结果表明在酵母茵体浓度达到高密度后再进行蛋氨酸 流加发酵最有利于SAM的合成，茵体浓度达到80g／L后一次性加入蛋氨酸和以2 g／h的流加速度 流加5h的蛋氨酸获得了较好的结果，分别使得相应的茵体终产量和SAM产量为89．1∥L、5．3∥ L和90．2 g／L、5．82g／L。 关键词：糙米水解物；S-腺苷甲硫氨酸；啤酒酵母 S腺苷蛋氨酸(S-adenosyl—L-methionine，简称本实验室保藏的高产SAM啤酒酵母S-W55进行了 W)是Cantoni于1952年发现的重要生物中间以糙米为主要原料并流加L-蛋氨酸进行发酵过程 体【l】，主要参与体内激素、神经递质、核酸、蛋白质和 优化的研究。 磷脂的生物合成和代谢以及抗氧化剂谷胱甘肽的形 1材料与方法 成，与体内各种解毒过程关系密切，是维护细胞膜正 常功能、人体正常代谢和健康不可缺少的重要生命 1．1菌种 cerevisiae 物质n]。SAM参与转甲基、转硫、转氨丙基等生化 S-W55)4℃ 啤酒酵母(Saccharomyces 反应【2J，是治疗肝硬化、抑郁症、冠心病、关节炎、肝 保藏于PDA斜面凹]。 功能紊乱等疾病的有效药物[3]。 1．2培养基 目前SAM的制备方法主要有化学合成法、体 PDA培养基作为平板分离及斜面培养基。种 外酶法、发酵法三种。化学合成的消旋体SAM需 子培养基(％)：糙米水解糖2、酵母粉O．3、KIq2P04 进行光学拆分，且产率低、原料价格昂贵、工艺复杂 0．3、NaI-IzP040．1、MgS040．15，自来水配制成1L， 并会产生环境污染问题[2】。体外酶法合成产物纯度 5．0。发酵培养基为对种子培养基中糙米水 调pH 高，但原料ATP成本太高，故只用于合成同位素标 解糖和酵母粉进行优化后的培养基。 记SAML引。微生物发酵法生产制备腺苷蛋氨酸的1．3糙米水解糖的制备 微生物有酵母、霉菌、细菌等，主要以筛选或构建 糙米购自湖北汉川，磨成细粉后用100目筛子 SAM高产酵母进行发酵为主[4割。通常以葡萄糖和 过筛，以1：2的比例将米粉和自来水混合成米浆，在 米浆中加人O．1 蛋氨酸流