工程化心肌组织养的实验研究.pdfVIP

摘要 Y 802730 摘 要 、目的：采用液态胶原为支架、分别以新生大鼠心室肌心肌细胞和胚胎干细胞 来源的心肌细胞为种子细胞构建工程化的心肌组织。 内容：考察以液态胶原为支架构建工程化心肌组织细胞的接种密度和胶原用 量对工程化心肌组织形成的影响，在此基础上建立从胚胎干细胞来源的心肌细胞 构建工程化心肌组织的方法。 方法：采用胰酶消化法分离新生大鼠心室肌心肌细胞，建立起批量获得胚胎 干细胞来源的心肌细胞的方法：采用旋转生物反应器批量扩增拟胚体、抗坏血酸 诱导胚胎干细胞向心肌细胞分化并采用Percoll不连续密度梯度离心富集心肌 细胞。在此这些实验的基础上，以液态胶原为支架、分别以新生大鼠心室肌心肌 细胞和胚胎干细胞来源的心肌细胞为种子细胞构建工程化的心肌组织。 结果：建立起新生大鼠心室肌心肌细胞分离、培养和鉴定方法以及批量获得 胚胎干细胞来源的心肌细胞的方法。在此基础上，分别采用新生大鼠心肌细胞和 胚胎干细胞来源的心肌细胞为种子细胞构建了类天然的工程化心肌组织。 结论：采用新生大鼠心室肌心肌细胞和胚胎干细胞来源的心肌细胞可以构建 出类天然的工程化心肌组织。 关键词：工程化心肌组织；胚胎干细胞；旋转生物反应器；Perc011不连续梯度 离心；抗坏血酸 Abstrct oⅡConst删c60nof Cardiac啊鲻ue study Engineered (Abst憎ct) constrIlct cardiac liquid as tissue(EcT)usingc01lagen obj∞6v硝：To engineered basedoncardiac asseedcellsderivedf如mneWbomratsand scafrold myocytes embryonicstcm(ES)cells，respectiVely． ofcellseeded aIld oncon咖ction Conten缸：Thce髓cts densitycollagenqllamity asscafroldare ofECT ofECTbasedonliquidcollagen iIlVestigated．Cons仃1lction EScellsisestablished． basedoncardiac derivedfrom myoc”es of 剐【e曲ods：Weis01atecardiac ventriclesneⅥ七omrats by myocytes疗om digestcd EScellsbasedon andset methods masscardiac f幻m 妈节sin up obtain主ng myoc”es EBs cellculture ofES mass of rotary system(RCCS)，induction pro“ction llsing