杞菊地黄汤防治NU诱导大鼠视网膜变性的实验研究.pdfVIP

杨柳博士论文 中文摘要 杞菊地黄汤防治MNU诱导大鼠视网膜 变性的实验研究 专业名称：眼科学 临床博士：杨 柳 指导老师：胡世兴 教授 中山大掌中山aJt．#-：1-中心 中文摘要 视网膜变性(retinal 关性黄斑变性(AIVlD)等因其致盲率逐年上升，已成为危害人类健康的主要致 盲性眼病之一．该病发生机制不清，目前仍无肯定疗效的防治策略．因此，寻找 毒副作用小的中药已成为治疗此类疾病的主要努力方向。 “ …建立良好的实验动物模型是研究的关键。N．甲基-N．亚硝脲 致畸、致癌、致突变作用，一直用于肿瘤学方面的研究。实验证实，大鼠腹腔注 射MNU可选择性地诱导光感受器细胞发生凋亡。传统中药杞菊地黄汤具有滋补 肝肾、滋肾填精、清肝明目的功效，已在眼科应用多年，是经典补益药方。 对于视网膜变性疾病的研究一直以来多集中于凋亡发生的相对后期阶段、针 对单个或数个基因的表达，尚缺乏对于早期、整体上游分子事件的全景式探讨； 中药杞菊地黄汤只有传统的中医药理论基础，缺乏可以量化的现代生物医学理论 依据，而高通量基因芯片技术的发展与应用，为解决上述问题带来了新的契机。 本研究拟利用基因芯片技术分析差异基因表达谱，探讨MNU诱导大鼠视网膜变 性的早期整体分子事件及杞菊地黄汤的药理效应，为进一步针对所筛察出的候选 基因进行研究提供理论基础与方向。 杨柳博士论文 中文摘要 第一部分 杞菊地黄汤防治MNU诱导大鼠视网膜变性的早期形态学观察 目的 早期形态学改变。 方法 (1)实验分组：药物组(杞菊地黄汤灌胃+hom皮下注射)、模型组(生理盐水 灌胃+加叮u皮下注射)和正常组(生理盐水灌胃+生理栽水皮下注射)；药 物注射后12h，颈椎脱臼猝死大鼠。 and erosin,HE)染色观察视网膜形态学改变并测 (2)苏木素一伊红(hematoxylin 量分析视网膜全层及外核层厚度； (3)透射电镜观察视网膜各层细胞超微结构的改变； 。 (4)末端脱氧核营酸转移酶介导Dutp缺121末端标记(terminaldeoxynucleotidyl 一仃aIls矗黝∞mediateddUTPnickend hbeling，TUNEL)法检测细胞凋亡，计算凋 亡指数。 结果 (1)光镜下备组大鼠视网膜组织学未见明显改变，视网膜全层及外核层厚度组间 比较均无显著性差异(P0．05)； (2)电镜下正常组和药物组光感受器细胞大小和核染色质分布均匀，模型组光感 受器细胞开始变小，核染色质开始浓缩，外节膜盘疏松，膜型不完整； (3)TUNEL染色见模型组和药物组外核层存在细胞凋亡，正常组未见． 结论 杞菊地黄汤通过抑制细胞凋亡等选择性拮抗IvlNU对大鼠视网膜光感受 器细胞的早期损伤。 关键词； N-甲基-N-]E]TI镢；杞菊地黄汤；动物模型；视网膜变性 Ⅱ 杨柳博士论文 中文捕要 第二部分 杞菊地黄汤对MNU诱发的大鼠视网膜变性基因表达谱的影响 目的 应用基因芯片技术研究杞菊地黄汤防治^孙n，诱导的sD大鼠视网膜交性 差异基因表达谱变化． 方法