酶工程绪论()分析报告.ppt

第一章 绪论 第一节 酶工程的研究内容 第二节 生物催化 第三节 国内外酶制剂工业概况 第一节 研究内容 一．概念 二．酶工程研究简史 三．研究内容 酶学与酶工程 （一）酶学 enzymology ：是生物化学的分支学科。 研究内容：酶的组成、结构、性质、功能、生物学合成及其调节等方面的基本理论和基本知识。 （二）酶工程 enzyme engineering ： 指酶的生产和应用的技术过程。酶学理论在工程方面的实际应用。 研究内容：酶的生物生产、酶的提取与分离纯化、酶和细胞固定化、酶的分子修饰、酶的非水相催化、酶反应器和酶的应用。 酶的生产（enzyme production）是指通过各种方法获得人们所需酶的技术过程，主要包括微生物发酵产酶、动植物培养产酶和酶的提取与分离纯化等。 酶的改性（enzyme improving）是通过各种方法改进酶的催化特性的技术过程，主要包括酶分子修饰、酶固定化、酶非水相催化和酶定向进化等。 酶的应用（enzyme application）是通过酶的催化作用获得人们所需的物质或者除去不良物质的技术过程，主要包括酶反应器的选择与设计以及酶在各个领域的应用等。 酶工程研究内容 ⒈ 酶制剂的生产2. 酶制剂的分离、提纯 工业用酶制剂一般是从细菌、酵母、植物和动物细胞中生产并且需要分离、提纯。 影响其价格的因素，主要是分离、纯化过程，其费用通常占生产成本的50％～70％，甚至高达90％。 分离步骤多、耗时长，往往成为制约生产的“瓶颈”。寻求经济适用的分离纯化技术，成为热点 。 目前已发现和鉴定的酶有8000多种，但大规模生产和应用的商品酶只有数十种。传统酶在工业上受到一些限制： 　①稳定性 　②酶的分离纯化工艺复杂，造价高 一）化学酶工程 1 自然酶的开发 2 酶的化学修饰 3 酶的固定化 4 人工合成酶的研究 （二）生物酶工程 1 酶基因的克隆表达 2 酶的遗传修饰 3 酶的遗传设计 3.1 化学酶工程 （1）化学修饰酶 可以改善酶的性能，以适用于医药的应用及研究工作的要求。 化学修饰酶的功能基：如α-胰凝乳蛋白酶表面的游离氨基修饰成亲水性更强-NHCH2COOH,使酶抗不可逆热失活的稳定性在60℃提高1000倍； 大分子修饰：可溶性高分子化合物如肝素、葡聚糖、聚乙二醇可修饰酶蛋白的侧链，提高酶的稳定性，改变酶的一些重要性质。 （2）人工模拟酶 利用有机化学的方法合成一些比酶简单的非蛋白质分子，可以模拟酶对底物的络合和催化过程，既可达到酶催化的高效性，又可克服酶的不稳定性。 酶的模拟工作可分为3个层次： 1 合成有类似酶活性的简单络合物； 2 酶活性中心模拟； 3 整体模拟，即包括微环境在内的整个酶活性部位的化学模拟。 目前用于构建模拟酶的这类酶模型分子有环糊精、冠醚、穴醚、笼醚、卟啉、大环番等。利用环糊精已成功地模拟了胰凝乳蛋白酶、核糖核酸酶、转氨酶、碳酸酐酶等。 3.2 生物酶工程 酶学与现代分子生物学技术相结合，主要包括： 用基因工程技术大量生产酶（克隆酶）； 对酶基因进行修饰，产生遗传修饰酶（突变酶 ; 设计新的酶基因，合成自然界即不曾有的新酶。 用基因工程技术大量生产酶（克隆酶） 对酶基因进行修饰，产生遗传修饰酶（突变酶 通过定点诱变技术，能产生被改造的新酶； 可改变酶的催化活性、底物专一性、最适PH;改变含金属酶的氧化还原能力；改变酶的别构调节功能；改变酶对辅酶的要求；提高酶的稳定性 例如将枯草杆菌蛋白酶的第99位门冬氨酸及156位谷氨酸替换为赖氨酸后，使这个酶在pH7时的活力提高了1倍，在pH6时活力提高了10倍。 例如,将T4溶菌酶的第51位苏氨酸转变成脯氨酸,使酶活力提高了25倍。 4、 酶与细胞固定化 一般酶催化反应是在水溶液中进行的，而固定化酶是将水溶性酶用物理或化学方法处理，使之成为不溶于水的，但仍具有酶活性的状态。 其中固定化酶技术是酶工程的核心。实际上有了酶的固定化技术，酶在工业生产中的利用价值才真正得以体现。? 酶固定化之后，不仅具有高的催化效率和高度专一性，而且提高了对酸碱和温度的稳定性，增加了酶的使用寿命；反应后易于反应产物分离，减少了产物分离纯化的困难，从而提高产量和质量。因此固定化酶已成为酶应用的主要形式。 固定化酶已在工农业、医药、分析、亲和层析、能源开发、环保和理论研究方面得到广泛应用。 6、 酶的应用研究 酶工程的应用主要集中于食品工业、轻工业以及医药工业中。 食品工业： 轻工业： ?酶用于洗涤剂制造----加酶洗衣服 ?在护肤品中添加SOD，清除皮肤表面的超氧自由基可抗衰老 ?蛋白酶用于皮革脱毛胶 医药： 诊断---可根据体液中酶活性的变化诊断疾病，一般健康人体液中所含的某一种酶的量是恒定在某一范围的，若发生变化则可能