第12章抗生素类药物剖析.ppt

（三）光谱法 IR UV： 240-330nm 庆大霉素无紫外吸收峰 链霉素B（甘露糖链霉素） 1. 来源 ：反应中间体 2. 方法 ： TLC中的杂质对照品法 杂质对照品：甘露糖 三．有关物质及组分分析 （一）有关物质 效价、毒副作用不同 Chp: 规定控制各组分的相对百分含量 （二）庆大霉素C组分测定 1. 测定方法： HPLC-衍生UV法 ( USP) 衍生电化学检测（BP) 蒸发光散射检测（Ch.P) 2. 衍生法原理： 3. 衍生方式：柱前衍生 4. 分离模式：RP-离子对HPLC SP：ODS MP：水-冰醋酸-甲醇-庚烷磺酸钠 定量方法：峰面积归一化 Rf: 某组分的峰面积； Rs: 所有组分峰面积之和 6. 讨论： 流动相： 极性过强，出峰慢 极性过弱，出峰快 离子对试剂： 克服C 组分的异吲哚衍生物在ODS柱上的吸附，增加保留； 衍生化试剂不形成离子对，保留值变化不大 微生物检定法：各国药典采用，测定效价 HPLC： 衍生化UV或电化学或蒸发光散射检测 离子对色谱法：烷基磺酸盐为反离子 离子交换色谱法： 酸性条件下在阳离子交换柱上分离 反相色谱法 四．含量测定 例：HPLC-蒸发光散射法测定硫酸依替米星含量 SP：ODS MP：三氟醋酸溶液-甲醇 分离模式：RP-离子对色谱 检测器：蒸发光散射 蒸发光散射检测器工作原理 检测三步曲 流动相要求： 必须是挥发性的，不能含有缓冲盐 样品要求： 雾化 蒸发 检测 挥发性低于流动相 检测三步曲示意图 色谱流出物与通入 的气体混合雾化 蒸发除去流动相 样品组分 形成气溶胶 强光照射气溶胶，产生散射光，检测 一．化学结构与性质 （一）结构 四并苯或萘并萘的衍生物 第四节 四环素类抗生素 多西环素：R3-羟基 美他环素：R3-羟基 1．两性与溶解度 弱酸性 弱碱性 与酸、碱均能成盐：多用盐酸盐 其盐：溶于水、酸或碱性溶液，不溶于有机溶剂 游离四环素类：pH4.5-7.2 内难溶于水 酚羟基、2个烯醇型羟基 二甲胺基 （二）性质 2．紫外和荧光性质 UV照射下，四环素类及其降解产物有荧光 3．不稳定性 干燥避光： 游离形式和盐类都较稳定 水溶液： 对酸、碱、各种氧化剂（包括空气中的氧）都不稳定 差向异构化 降解性质 （1）差向异构化 PO43-、枸橼酸根、Ac-等阴离子： 可加速差向异构化 土霉素：不易差向异构化(氢键形成→较稳定) A A pH2.0~6.0 （2）降解性 酸性下降解：6位上-OH与5a位上的H发生消去反应 D D D C B B C B C 脱水四环素类 碱性降解： OH- 四环素 异四环素 1．浓硫酸反应 可区别各种四环素类 二．鉴别试验 2．三氯化铁反应 酚羟基的反应 3．TLC EDTA作用： 克服痕量金属离子造成的拖尾 4. HPLC 5. UV、IR 有关物质 异构体，降解物 4-差向四环素（ETC） 差向脱水四环素（EATC） 脱水四环素（ATC） 盐酸金霉素（CTC） 盐酸四环素中有关物质的检查：HPLC 加校正因子的主成分自身对照法 不加校正因子的主成分自身对照法 p438 三．特殊杂质检查 四．含量测定 HPLC法 例：盐酸四环素的含测 RP-HPLC 三乙胺 p440 外标一点法 本章基本要求 掌握β-内酰胺类抗生素的结构特征、理化性质 掌握β-内酰胺类抗生素的呈色鉴别反应、HPLC含量测定方法 掌握氨基糖苷类抗生素的结构特征、理化性质、鉴别方法（麦芽酚反应、坂口反应、UV） 掌握庆大霉素C组分的测定、HPLC含量测定方法 掌握四环素类抗生素的结构特征（四环素、金霉素、土霉素）和性质 第十二章抗生素类药物的分析 Antibiotics 抗生素类药物的质量分析 鉴别：真伪 检查： 含量（