超脉冲CO2激光联合胸腺肽治疗尖锐湿疣的疗效及机制分析.docVIP

超脉冲CO2激光联合胸腺肽治疗尖锐湿疣的疗效及机制分析 　　【摘要】目的：观察超脉冲CO2激光联合胸腺肽治疗尖锐湿疣的临床疗效，探讨其复发机制。方法：选取40例尖锐湿疣患者为观察组，并随机选取40例正常体检人群为对照，比较两组人群体内T淋巴细胞亚群及IL-2、IFN-γ的差异。所有尖锐湿疣患者均采用CO2激光联合胸腺肽治疗，比较治疗前后淋巴细胞及IL-2、IFN-γ的变化。随访6个月，按照是否复发分为治愈组及复发组，分析细胞免疫对复发的影响。结果：尖锐湿疣患者CD4细胞比例（Th1）及其分泌的IL-2、IFN-γ显著低于正常人群，而Th2、CD8细胞比例高于正常人群，其差异具有统计学意义（P005）。40例患者均完成治疗，治疗后Th1细胞比例、IL-2及IFN-γ均显著上升，Th2、CD8细胞比例下降，提示超脉冲CO2激光联合胸腺肽治疗可改善患者体内Th1、CD8细胞亚群的失调状态，提高IL-2、IFN-γ水平。30例患者获得治愈，治愈率750%，10例患者复发，复发率250%。复发患者Th1细胞比例、IL-2及IFN-γ均显著低于治愈患者，而CD8细胞无显著性差异，提示复发患者仍存在Th1细胞免疫功能低下。结论：超脉冲CO2激光联合胸腺肽治疗可改善患者体内Th1/Th2、CD4/CD8细胞亚群的失调状态，提高IL-2、IFN-γ水平；复发患者Th1细胞低水平表达，仍处于免疫平衡紊乱状态。 　　【关键词】超脉冲CO2激光；胸腺肽；尖锐湿疣 　　【中图分类号】R7525+3【文献标志码】 　　尖锐湿疣（condyloma acuminatum， CA）是由人乳头瘤病毒（human papilloma viruses，HPV）感染的性传播疾病，其特征为多发鳞状上皮增生，初为散在或呈簇状增生的小乳头状突起，呈粉色或白色，质地柔软，可互相融合，增大为鸡冠或桑椹状。病变多位于性交易损部位，如龟头、冠状沟、大小阴唇内侧、尿道口等部位。以往采用冷冻、腐蚀剂、电烧灼等治疗方式，患者痛苦大、出血多，且疗效较低，复发率高达50%以上[1-3]，由于病情反复且多发的尖锐湿疣常累及尿道口、宫颈等特殊部位，多次手术治疗容易造成损伤，严重影响患者的生活质量。我科采用超脉冲CO2激光联合胸腺肽肌注治疗尖锐湿疣取得较为肯定的效果，激光切割具有止血快，创面干燥，降低手术痛苦的特点[4，5]，肌注胸腺肽可有效预防尖锐湿疣复发。现就其疗效及临床机制做一分析，报告如下。 　　1资料与方法 　　11一般资料 　　采用整群抽样的方法选取2010年6月至2012年6月收治的40例尖锐湿疣患者为研究对象，所有患者均有不洁性交史，根据症状、临床表现，5%醋酸白试验阳性确诊，男性29例，女性11例；年龄22～64岁，平均（326±69）岁。皮损大小不一，数量2～11个，疣体直径2～29mm，病程6d～6个月，男性主要分布于龟头、冠状沟、尿道口、包皮内外板、系带、肛周等，女性主要分布于阴道壁、大小阴唇、尿道口、宫颈、会阴、肛周等。排除标准：（1）对治疗方法或药物过敏；（2）合并其他可能影响淋巴细胞功能的疾病；（3）严重免疫功能低下。采用随机数字表法随机选取我院健康体检人群40例作为对照组，其中男性27例，女性13例；年龄25～66岁，平均（331±72）岁。两组患者之间的性别与年龄之间的差异无统计学意义（P005），具有可比性。 　　12治疗方法 　　观察组应用超脉冲CO2激光联合胸腺肽（40mg肌注，1次/周）治疗，先用2%利多卡因局麻，超脉冲CO2激光高温使疣体气化并彻底消除。术后口服抗生素3～5d，患处外用莫匹罗星软膏直至愈合，连续治疗4周，随访6个月。 　　13研究方法及评价标准 　　治疗前抽取两组人群空腹血液测定T淋巴细胞亚群（CD4、CD8）及IL-2、IFN-γ的差异。标本滴入100μL EDTA抗凝，离心后在-70℃冰箱保存。严格按Cytodetect 试剂盒说明进行操作， Fioll 密度离心法分离淋巴细胞，并用 RPMI1640 培养液稀释为1×106/mL。 200μL 淋巴细胞悬液滴入 96 孔板培养，分别加入佛波酯（PMA）、莫能霉素（monensin）、依诺霉素（ionomycin）3μL，然后置于37℃，5%CO2中培养约5h。然后置于离心管，1200r/min 离心约5min，弃上清液。多聚甲醛液固定 10 min后用 PBS 洗涤，再次离心约5min，弃上清， 并用洗涤剂悬浮细胞置入4℃冰箱中过夜。洗涤剂洗涤，将抗 CD4-FITC 单抗滴入细胞悬液，混匀后室温避光孵育约 20 min。滴加破膜剂，离心后弃上清液，分别滴加抗IL-2 FITC单抗，IFN-γFITC单抗，室温避光孵育，PBS洗涤后离心，去上清液，再次