动力学荧光法测定抗坏血酸.pdfVIP

第25卷增刊 分析测试学报 V01．25 FENXICESHI ofInstrumental NOV．2006 2006年11月 XUEBAO(JournalAnalysis) 动力学荧光法测定抗坏血酸 杨 明1，席永清2”，邱海鸥3，汤志勇3 (1．东华大学分析测试中心，上海200051；2．上海光谱仪器有限公司，上海200233； 3．中国地质大学材料科学与化学工程学院，湖北武汉430074) 抗坏血酸(Vc)是人体的必需营养物，也是治疗若干种疾病的药物。抗坏血酸的测定方法通常是 利用碘量法，或形成有色物质的间接光度法，以及紫外分光光度法。动力学法测定微量抗坏血酸报道 较少…。 本文基于钒催化溴酸钾氧化罗丹明B的反应，抗坏血酸对上述反应具有活化作用，建立了抗坏血 酸的测定新方法。动力学荧光分析中，通常使用固定时间法进行研究，终止反应后，测定反应加入催 化剂或活化剂前后荧光强度变化的方法。该法反应时间不易控制，误差较大。本文采用时间驱动技术 与动力学中斜率法相结合的研究方法，测定加入活化剂前后的反应速率差值，该法能直观地再现反应 过程中荧光强度的变化，不需控制反应时间，消除了某些催化反应时间不易控制的问题。方法选择性、 精密度均较高。 1 实验部分 1．1 仪器与试剂 LS一55型荧光分光光度仪(英国u．K．，PerkinElmerLimited)。 1．2实验方法(略) 2结果与讨论 2．1 激发与发射光谱图 am和577 罗丹明B(RB)，在水溶液中有强烈的荧光效应，最大激发和发射波长分别为553 nm。 在时，反应明显加快(曲线4，4’)，而在无催化剂钒存在时(曲线2，2’)，荧光强度改变不大，表 明Vc对催化该反应具有活化作用，其含量与体系的荧光强度成正比，据此详细研究了测定Vc的最佳 实验条件。 2．2反应动力学 在HCl一KH：PO。缓冲溶液中，采用时间驱动技术研究了体 系的动力学性质。钒催化KBrO，氧化RB，荧光强度不断降低， 降低速率为一常数值，说明该反应为零级反应。加入Vc后荧光 降低加速，其速率”与未加入Vc速率％的差值舢与Vc质量浓 度p成正比，即为斜率法测定Vc的依据。有文献[2]报道采用 54【， 5∞ 6006zo NaAc终止反应后，再用固定时间法测定。本实验发现NaAc并5叫520 580 ⅣIim 不能有效终止反应，采用斜率法进行测定。 图1 荧光激发与发射光谱图 2．3缓冲溶液与酸度的影响 1，1’：HCI—KH2P04，RB，V(V)； 缓冲溶液和酸度对体系荧光强度，以及反应速率影响明显。 2，2’：HCI—KH2P04，RB，Vc，KBr03； 本文考察了HCl．KH：PO。、HCI—KCI等10种缓冲溶液介质对体系 的影响。发现在HCI—KH：PO。缓冲溶液中劬最大，且反应稳定， 当HCI—KH：PO。缓冲溶液用量为1．6mL时，血值最大，效果 最好。 2．4各试剂用量的影响 采用单因素法分别试验了荧光试剂I．0×10。mol／LRB溶液、催化剂1．000 s／L钒溶液、氧化剂 一7l