毛细管电泳-电致化学发光测定诺氟沙星的研究.pdfVIP

毛细管电泳 - 电致化学发光测定诺氟沙星的研究 苏彩娜 康艳辉 邓必阳 ＊ 广西师范大学化学化工学院 , 桂林 541004) 摘 要 基于诺氟沙星对联毗睫钉在铂电极上的电致发光信号有增敏作用 , 与毛细管电泳结合 , 建立了一种 测定诺氟沙星的电化学发光分析新方法 O 研究了工作电极电位 ~ 磷酸盐缓冲液浓度及其 p~ 值 ~ 进样电压和 进样时间等实验参数对诺氟沙星测定的影响 O 在优化的实验条件下 , 其浓度线性范围为 0.02 ~10 - mol/L; 检出限 3 ) 为 0.0048 - mol/L; 峰面积的相对标准偏差为 2.6% 1.0 - mol/L,l=11)O 本法可直接用于尿液 中诺氟沙星 NFLX) 含量的测定 O 回收率为 92.7% ~97.9%, 结果满意 O 关键词 毛细管电泳 , 电致化学发光 , 诺氟沙星 , 联毗睫钉 2006-01-13 收稿 ;2006-05-12 接受 本文系国家自然科学基金 No 和广西科学基金 No.0236014) 资助 1 引 言 诺氟沙星 Norfloxacin,NFLX), 化学名为 1- 乙基 -6- 氟 -1,4- 二氢 -4- 氧代 -7- 1- 听咦基 )-3- 喳琳竣酸 , 属于第 3 代氟喳诺酮类抗菌药物 , 具有抗菌谱广 ~ 抗菌作用强 ~ 副作用小 ~ 组织分布较好等药动学特点 O NFLX 对细菌呈杀菌作用 , 尤其对革兰氏阴性菌及绝大多数菌株有较好的抗菌活性 1] O 文献报道 NFLX 的分析方法有分光光度法 2] ~ 荧光法 3,4] ~ 高效液相色谱法 5] ~ 电分析法 6,7] 及化学发光法 8,9] 等 O 电化 学发光分析法具有电化学分析与化学发光分析的优点 , 把毛细管电泳与电致化学发光结合起来 , 是一种 高效分离与高灵敏度检测的新方法 10] O 近年来 , 毛细管电泳 - 电致化学发光 CE-ECL) 已在一些胺类药 物及氨基酸等生化物质的检测中得到了广泛应用 O 而用毛细管电泳 CE)- 电致化学发光 ECL) 来测定 NFLX 尚未见报道 O 本研究根据 NFLX 能与用电化学方法产生的 Ru bpy) 3 + 3 反应且发光 , 建立了 CE- ECL 测定 NFLX 的新方法 O 本法具有灵敏度高 ~ 样品用量少等特点 , 可直接用于人尿中 NFLX 的测定 O 2 实验部分 2.1 仪器与试剂 MPI-B 型多参数化学分析测试系统 西安瑞迈电子科技有限公司 );P~SJ-4A 型酸度计 上海精密科 学仪器有限公司 ); 电化学检测采用三电极系统 : 直径 300 - m 铂盘电极为工作电极 ,Ag/AgCl 电极为参 比电极 , 铂电极为辅助电极 ; 未涂层石英毛细管 40 cmX75 - mi.d. 河北永年光导纤维厂 )O 联毗睫钉 美国 Alfa 公司 ); 磷酸二氢钠 ~ 磷酸氢二钠和乙睛均为分析纯 , 实验用水为亚沸蒸馏水 ; 诺氟沙星标准 品 中国药品生物制品检验所 ,98.9%) 用水溶解 , 配成浓度为 50 - mol/L 溶液 , 避光于 4 C 储存备用 , 使 用时按要求稀释即可 O 2.2 实验方法 工作电极每两星期取出用 0.3 - mAl 2 0 3 粉末重新抛光 , 在水中用超声波洗净后 , 于显微镜下将其放 置在正对毛细管出口末端处 , 调节两者距离约 300 - mO 采用 12 kVX6 s 电驱动进样 , 分离电压为 15 kVO 每次使用前用水冲洗 5 min, 再用 15 mmol/Lp~8.2 磷酸盐缓冲液冲洗 5 minO 所有溶液在进 入毛细管前须用 0.45 - m 醋酸纤维素膜过滤 O ECL 池结构与文献 11] 中的设计相似 , 实验前 ECL 池中 充满 5 mmol/LRu bpy) 2 + 3 和 50 mmol/Lp~8.0 磷酸盐缓冲液 350 - L, 实验 3 h 后更换新鲜 ECL 溶液 , 以保持实验重现性 ; 光电借增管的电压设置为 +800 VO 2.3 尿样处理 取志愿者新鲜尿样 1.00 mL 于 10 mL 离心管中 , 加入乙睛 5.00 mL, 混合 , 旋涡震荡 2 min, 以 4000 r/min 离心 5 min, 取上层清液于 25 C 氮气流下吹干 , 残余物溶于 1.00 mL 水中 , 过滤后滤液用于测定 O 第 34 卷 2006 年 9 月 分析化学 FENXI~UAXUE) 研究简报 ChineseJournalofAnalyticalChemist