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毛细管电泳法测定左旋多巴药片的光学纯度 林向成 赵书林＊ 卢 昕 李舒婷 （广西师范大学化学化工学院，桂林 541004） 摘 要 建立了一种毛细管电泳测定左旋多巴药片光学纯度的新方法。!，-多巴（!，-dopa）用 2，4-二硝基 氯苯（CDNB）衍生，以 ! -环糊精（ ! -CD）为手性选择剂，在硼砂（ pH 9. 0）缓冲溶液中进行毛细管电泳手性分 离。采用紫外检测，测定波长为 220 nm。在测定条件下，对映体分离在 9 min 内完成。-dopa 中 !-dopa 的含 量在 0. 10% ~ 2. 0% 范围内，与 !-dopa 的峰面积呈现良好的线性关系。在 -dopa 中加入不同量的!-dopa，测 得回收率在 96% ~ 102% 之间，每个样品分别测定 3 次，其相对标准偏差（RSD）小于 2. 3% 。方法用于市售左 旋多巴药片的分析，测得左旋多巴药片中 !-dopa 的含量为 0. 20% 。 关键词 左旋多巴，毛细管电泳，对映体分离，光学纯度检验 2005-06-10 收稿；2005-11-14 接受 本文系国家自然科学基金项目（No.和广西高校基金项目资助。 ! 引 言 手性药物对映异构体的光学纯度测定，即对映体杂质检验，在手性药物的开发和质量控制及生命 科学研究中具有非常重要的意义［1］。近年来，该领域的研究已引起了人们的重视，多种手性药物的光 学纯度测定方法，已相继报道［2 ~ 4］。 左旋多巴（-dopa）一直被认为是一种能够减轻帕金森病人症状的有效药物。它通过血脑屏障进入 神经中枢，经多巴脱羧酶作用转化成多巴胺而发挥药理作用，从而改善帕金森病症状。左旋多巴还可以 提高大脑对氨的耐受力，用于治疗肝昏迷，改善神经中枢功能。然而，左旋多巴的对映体 !-dopa 则具有 毒性，在使用含有 -dopa 和 !-dopa 的外消旋体药物时，由于活性和非活性成分具有不同的代谢而造成 严重的副作用［5］。因此，在合成 -dopa 和 -dopa 在生理学、药理学及临床研究过程中，对 dopa 的对映 体分离及光学纯度检测均提出了严格的要求。 目前，有关 dopa 对映体拆分及左旋多巴药片光学纯度检测的报道较少。MiIada 等［6］使用高效液相 色谱法检测了左旋多巴中的对映体杂质。Lou 等［7］采用超临界流体色谱法分离了 dopa 对映体。 Sarac ［5］、Maruszak［8］和 DoIezaIova［9］等采用毛细管电泳技术，分别以羧甲基- ! -环糊精、羟丙基（2，3-联乙 酰-6-磺酸基）- ! -环糊精和磺丁基醚- ! -环糊精作为手性选择剂，实现了 !，-dopa 的手性拆分。MarceIo 等［10］利用手性冠醚拆分 dopa 对映体，并检测了左旋多巴制剂的光学纯度。在上述毛细管电泳方法中， !，-dopa 对映体的手性拆分，需采用特殊合成的环糊精衍生物作为手性选择剂，且由于 dopa 的消光值 较小，检测灵敏度较低，因而很难应用于左旋多巴药片的光学纯度检验。为了提高 !，-dopa 的手性拆 分效率和检测的灵敏度，本文采用 2，4-二硝基氯苯（CDNB）作为衍生试剂衍生 dopa，以价廉易得的 ! -环 糊精（ ! -CD）为手性选择剂，在 9 min 内实现了 !，-dopa 对映体的快速毛细管电泳分离，及左旋多巴药 片的光学纯度检测，并测得市售左旋多巴药片中 !-dopa 含量为 0. 20% 。该方法分离完全，分离度高达 6. 23，检测灵敏度较高，分析速度快，能很好的满足左旋多巴药片的光学纯度检验要求。 # 实验部分 #. ! 仪器和试剂 HP 3D型高效毛细管电泳仪（美国 AgiIent 公司）；未涂层石英毛细管，总长 56 cm，有效长度50 cm，内 径 50 ! m（AgiIent 公司）；PHSJ-4A 型酸度计（上海雷磁仪器厂）。 -dopa（ 99. 0% ，美国 Acros organics 公 司）；dopa 外 消 旋 体（ 日 本 东 京 化 成 工 业 株 式 会 社）； 第 34 卷 2006 年 6 月 分析化学（FENXI HUAXUE） 研究简报 Chinese JournaI of AnaIyticaI Chemistry 第 6 期 859 ~ 862 !-环糊精（ ! -CD）， -环糊精（ -CD）， # -环糊精（ # -CD）（ 美国 AIdrich 公司）；硼砂（ AR，湖南试剂厂）； 2，4-二硝基氯苯（CDNB）（ 99% ，美国 Across organics）；乙腈（ 色谱纯，上海化学试剂公司）；所用水为 石英亚沸高纯蒸馏水。 2. 2 溶