盐酸埃克替尼对人肺腺癌细胞系PC-9作用的比较蛋白质组学研究.pdfVIP

唱 nu A E E E 中华肺部疾病杂志(电圭报)到5 年口月 第8 卷第6 期也n J L.m!; Dis(E1础。，ic Edition). 队m加Xl15. Vo18. No.6 ·论著· 盐酸埃克替尼对人肺腺癌细胞系 PC-9 作用的 比较蛋白质组学研究 刘晓丽李维孟夏张玉萍 明宗娟史红阳石捷生中玉洁 王薇杨拴盈 [摘要] 目的应用比较蛋白质组学方法分析盐酸埃克替尼作用前后人肺腺癌细胞系 PC-9 细胞相 关蛋白的变化，从蛋白质水平探讨埃克替尼的作用机制。方法应用人类 EGFR 基因突变检测试剂盒和 实时定量PCR 仪检测 PC-9 细胞 EGFR 突变;应用 MTI 法检测埃克替尼对 PC-9 细胞增殖的影响;应用 双向凝胶电泳(2-DE) 技术分别对未经干预的PC-9 细胞总蛋白和经埃克替尼作用的PC-9 细胞总蛋白进 行分离，获得蛋白质表达谱;应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS) 结合生物信息 学进行蛋白质鉴定。结果 PC-9 细胞的 EGFR 基因存在第 19 外显子缺失突变;在1O-4-1O-9M 浓度范围 内，埃克替尼明显抑制 PC-9 细胞的生长，且呈浓度依赖;埃克替尼诱导前后表达水平主1. 5 倍的蛋白点 共有56 个。选取差异注l. 7 倍的 29 个蛋白点进行 MALDI-TOF-MS 分析，最终鉴定出 16 种蛋白质。根 据功能，这些蛋白可分为代谢酶类、细胞骨架类、分子伴侣、信号传导分子、转录及翻译相关蛋白。结论 应用比较蛋白质组学方法初步鉴定了 16 种蛋白质，这些蛋白质与埃克替尼作用机制密切相关，部分可 能成为新的分子治疗靶点。 [关键词] PC-9 细胞; 埃克替尼; 比较蛋白质组学; 生物信息学 中图法分类号:盯63 ， R743 文献标i只码:A Comparative proteomics on mechanisms of lung adenocarcinoma cell line PC-9 induced by icotinib Li山uX刀wωolμi ， μLi Wei , Mer咱l晾gX必1a叽， Zh阳α喀n1哆g Yl叩L伊伊p严i仇ng ， Ming Zhongj归n ， Shi hongyan , Shi Jie , Zhong Ynjie , Wang 吆叨 ， Wei , Yang Shanying. Department 0/ Respiratory Medici肘， the Second A庐liated Hospital , Medical School 0/Xi an Jiaotong University , Xi an 710004 , China Co汀esporuling author: Yang Shanying , Email: yangshuanying66@163.com [ Abstract] Objective To analyze icoti曲-associated proteins of PC-9 cell with comparative proteomics and bioinformatics technique to discuss molecule mechanism of icotinib. Methods Amoy Dx and real-time PCR were used to detect the EGFR mutation in PC-9 cells gene. MTI was used to investigate theproliferationinhibition oficotinibon P