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红掌组培快繁体系建立的探讨 　　[摘要]通过正交试验和单因素试验对红掌的叶片组培快繁体系的建立进行了探讨。试验表明：愈伤组织诱导培养基为MS+6-BA2.0+2,4-D0.2：丛生芽诱导和芽的继代增殖培养基为MS+6-BA2，0+KTO.1+NAAO.5；试管苗生根培养基为1/2MS+NAA0.5效果较好。 　　[关键词]红掌；组织培养；快速繁殖；体系建立 　　 　　引言 　　 　　红掌(Anthu rium and raeanum)又名安祖花、大叶花烛，为天南星科红掌属多年生常绿草本花卉，四季开花；性喜温热多湿而又排水良好的环境，怕干旱和强光暴晒i其适宜生长昼温为26℃-32℃，夜温21℃～32口C；所能忍受的最高温度为35℃，可忍受的低温为14℃；光照度以1600 丨x～20000 丨×为宜，空气相对湿度(RH)以70％-80％为佳；其株高一般为50 cm～80 cm。红掌原产于南美洲热带雨林潮湿、半荫的沟谷地带等地区的热带雨林中。红掌是观花观叶两者兼宣的观赏植物，其花色鲜艳，花姿奇特美妍，且花期持久；其叶暗绿，具金属光泽，既可盆栽观赏，又是名贵的鲜切花材料。现在欧洲、亚洲、非洲均有广泛栽培。我国于20世纪70年代开始引种栽培。红掌不易结实，一般采用分株繁殖，但其肉质根系生长缓慢、分蘖较少，繁殖率极低，用分株繁殖难以扩大生产，故常规繁殖法不能满足其市场的需求。而红掌组织培养被认为是红掌商品生产中快速繁殖的最理想途径。 　　自Pierik(1974)进行红掌组织培养研究并取得成功以来，国内外学者对其进行了大量的组织培养和快速繁殖的研究报道。我国自二十世纪九十年代开展研究以来，现已掌握了红掌不同器官愈伤组织的诱导、不定芽的分化及其继代增殖、生根诱导与移栽、试管苗培育等技术为快速、大批量使红掌进行繁殖，笔者参考前人的经验和成果，自2003年以来，对红掌叶片的组培快繁技术进行了研究探讨，并成功的建立了快繁体系，现已应用于工厂化育苗。现将红掌叶片组培快繁体系的建立介绍如下： 　　 　　材料与方法 　　 　　材料 　　材料为广州绿化公司白云苗圃盆栽红掌(AnthurIum andraeanum)，取其叶片作为外植体。 　　 　　试验方法 　　无菌材料的建立选择红掌变色期(即新生叶展开后约2周)的幼嫩叶片，流水中洗10min左右，移至超静工作台上于10％NaCI0(次氯酸钠)溶液浸泡10min,70％-75％乙醇浸泡25s-30s，无菌水冲洗2次，再用0.1％Hgc丨2(氯化汞)溶液消毒8min～10min，无菌水漂洗5次后：切除变色部分，把叶片切片成1cm见方的小叶块，叶背朝下，接种到MS+6-BA(2.0、2.5、3.0)+2,4-D(0.2、0.5)的愈伤组织诱导培养基中，然后置于26℃±2℃下，暗培养3d～5d，然后再给予光照。 　　当愈伤组织生长至直径约0.5 om左右时，切下并转接到MS+6-BAl.5～2.5+KT0.1+NAA0.5的不定芽分化诱导培养基上。 　　继代增殖培养将红掌丛生芽分割成基部带愈伤组织的单芽，转接于新的继代增殖培养基中，进行不定芽的分化和增殖培养培养条件与丛生芽诱导培养相同。其培养基采用L9(34)正交设计，基本培养基为MS：生长调节物质：6-BA(1.5、2.0、2.5)+KT(0.0、0.1、0.5)+NAA(0.1、0.5、1.0)。每个处理培养基接种20瓶，每瓶接种2小块，继代培养2代后(继代转瓶2次)统计芽增殖系数(每个瓶内丛生芽数/每个瓶原有接种芽数/芽继代次数和每个瓶内的有效苗(长出3片～4片叶，叶绿而平展，生长正常的小苗)。 　　生根诱导培养不定芽生长至2.5cm以上、具4片左右叶时，自底部切下并转接到1/2Ms+NAA(0.1、0.5、1.0)生根诱导培养基，进行生根培养。培养15d后统计其生根率(生根的不定芽数／接种的不定芽数)。 　　以上培养基中均加0.7％琼脂，糖30％，PH值5.8～6.0，培养温度为26℃±2℃，光照度1000丨×～1500丨xl光照11h/d～12h/d。 　　 　　结果与分析 　　 　　无菌材料的建立 　　建立无菌材料是将红掌叶片经脱分化、再分化而获得无菌芽，为继代增殖作准备。试验结果表明，当其叶片接种到愈伤组织诱导培养基上，愈伤组织的诱导存在着明显差异，―般需要40d～60d，便可出现淡黄色的愈伤组织：其嫩叶愈伤组织诱导率在65％以上。MS+6-BA2.0+2.4-D0.2培养基是较为理想的脱分化培养基，愈伤组织诱导率为91％左右。 　　将愈伤组织转接到不定芽分化诱导培养基中，继续培养20d～30d，愈伤组织会由黄色转为黄绿色，随后愈伤表面出现许多不规则状的小突点，再继续培养30d～40d，部