RPHPLC法测定复方青骨凝胶中大黄素的含量.docVIP

RPHPLC法测定复方青骨凝胶中大黄素的含量 【摘要】 目的 建立测定复方青骨凝胶中大黄素含量的 方法 。方法 采用RPHPLC法，以Waters Xterra RP18(3.9 mm×150 mm,5.0 μm)为色谱柱；甲醇水磷酸（体积比8020∶0.1）为流动相；检测波长：440 nm；流速：1.0 mL/min；柱温：30 。结果 大黄素的进样量在0.352 4～1.762 0 μg范围内与峰面积呈良好的线性关系，r＝0.999 9；平均加样回收率为101.99％，RSD为2.79% (n=6)。结论 本方法简便、快速、准确，可作为复方青骨凝胶中大黄素的含量测定方法。 【关键词】 复方青骨凝胶；高效液相色谱法；大黄素 　　Abstract:Objective To establish a RPHPLC method for determining the content of emodin in Fufang Qinggu gel. Method The sample was analyzed on a Waters Xterra RP18 (3.9 mm×150 mm, 5.0 μm) column by using methanolwaterH3PO4（8020∶0.1）as mobile phase. The detection wavelength was at 440 nm and flow rate 1.0 mL·min-1.Result The linear range of sinomenine was 0.352 4～1.762 0 μg (r＝0.999 9). The average recovery was 101.99％with RSD 2.79% (n=6).Conclusion This method is simple，rapid and accurate which could be used for determining the content of emodin in Fufang Qinggu gel. 　　Key words:Fufang Qinggu gel； RPHPLC ；emodin 　　复方青骨凝胶是在全国十佳女中医师、我院中医科杨嘉珍主任医师多年有效 治疗 腰腿痛的中药汤剂验方的基础上，以青风藤、大黄、四方木皮、杜仲、骨碎补等19味中药配伍，并以卡波姆为辅料制成的、具有缓释作用的新型的复方中药外用凝胶剂，该制剂对风湿、类风湿引起的关节痛疗效确切。方中大黄为该制剂抗炎的主药之一，而大黄素为其主要成分。为了更好地控制该制剂的质量，我们 参考 文献 ［1-6］，采用高效液相色谱法测定其中大黄素的含量，结果表明方法简便、快速、准确，可作为复方青骨凝胶质量控制的方法。 　　1 仪器与试药 　　Waters液相色谱仪（Waters600泵，7725i六通阀，996二极管阵列检测器，Millennium32数据处理系统），TU1901紫外可见分光光度计（苏州市莱顿 科学 仪器有限公司）。大黄素对照品（ 中国 药品生物制品检定所，批号：110757-200206），甲醇（色谱纯）；磷酸( 分析 纯)，水为重蒸水。复方青骨凝胶（本院自制，批号：060603，060819，061103，070314，070723，070805）。 　　2 方法与结果 　　2.1 色谱条件及系统适用性试验 　　色谱柱： Waters Xterra RP18(3.9 mm×150 mm,5.0 μm)；流动相为甲醇水磷酸（体积比8020∶0.1）；检测波长：440 nm；流速：1.0 mL/min；柱温：30 。在此色谱条件下，大黄素的保留时间约为11.5 min。色谱图见图1。 　　2.2 溶液的制备 　　2.2.1 对照品溶液的制备 　　精密称取大黄素对照品8.81 mg，置25 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，得质量浓度为0.352 4 mg/mL的大黄素对照品溶液。 　　2.2.2 供试品溶液的制备 　　精密称取复方青骨凝胶约8.0 g置干燥锥形瓶中，加入甲醇15 mL，超声提取15 min，放冷至室温，过滤，滤液置50 mL量瓶中。重复超声提取3次，合并滤液并用甲醇定容至50 mL，混匀，溶液经0.45 μm微孔滤膜过滤，取续滤液，即得。 　　2.2.3 阴性样品制备 　　按处方制备不含大黄药材的阴性样品，按“2.2.2”项方法制成阴性样品溶液。 　　A.大黄素对照品 B.样品 C.阴性样品 　　图1 高效液相色谱图（略） 　　Fig.1 HPLC chromatograms of samples 　　2.3 标准曲线的制备