植物miRNA靶基因验证研究进展.pdf

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生物技术进展 2017年 第7卷 第2期 102~105 CurrentBiotechnology ISSN 2095—2341 植物 milLNA靶基因验证研究进展 何炫程, 吕鹤书,黄捷飞, 马兰青, 杨明峰 北京农学院生物科学与工程学院,农业部华北都市农业重点实验室 ,北京 102206 摘 要:植物microRNA(miRNA)可以利用碱基互补配对原则对靶基因进行识别并介导靶基因(mRNA)的切割或翻译 抑制,以此机制来调控靶基因的表达。主要从作用方式及实验体系两大方面入手,综述 了植物miRNA与其靶基因的作 用机制,以及植物miRNA靶基因验证方法的研究进展,旨在更深入的探究miRNA与其靶基因的作用关系。 关键词:植物miRNA;靶基因;验证 DOI:10.3969/j.issn.2095-2341.2017.02.03 AdvancesonTargetGeneAlidationM ethodofPlantmiRNA HEXuancheng,LVHeshu,HUANGJiefei,MALanqing,YANGMingfeng KeyLaboratoryofUrbanAgriculture(NoAhChina), nc ofAgrciulture,CollegeofBiologicalScienceandEngineering,BeijingUniversityof Agriculture,Bejiing102206,China Abstract:PlantmicroRNAs(miRNAs)canrecognizethetargetgene(mRNA)bytheprincipleofcomplementarypairingand mediatethecleavageortranslationinhibitionofthetargetgene,andthemechanism wasusedtoregulatetheexpressionoftarget genes.Inthispaper,wereviewedthemechanism ofplantmiRNAanditstargetgenes,andtheresearchprogressofplantmiRNA targetgenevalidationmethodsfromtwoaspectsofthefunctionandtheexperimentalsystem,whichwasobjectivedtoexplorethe relationshipbetweenmiRNA anditstargetgenes. Keywords:plantmiRNA;targetgene;validation 自1993年 Lee等 和Wightman等 分别在 法从不同角度以及不同方面对靶基因进行验证, 研究线虫胚胎发育时发现了 19—25个核苷酸组 现已颇具成效。本文将 目前已有的验证方法归纳 成的非编码单链小 RNA以来,就此揭开 了研究 总结,综述 了 目前效果最佳及使用较多的验证 miRNA的序幕。在植物中,miRNA通过对其相应 方法 ,以期为今后 miRNA 的研 究提供理论 靶基因进行互补识别,以此来介导靶基因的调控 , 基础 。 表现为大部分miRNA对其相应靶 mRNA进行切 割,只有小部分的miRNA对靶基因进行翻译抑 1 miRNA与靶基因作用机制 制。这与miRNA和靶 mRNA的互补程度有着密 切关系。已有研究表明,miRNA通过作用于其相 1.1 miRNA介导靶基因的降解 应靶基因,对植物生长发育等诸多方面都具有调 目前对于miRNA如何介导mRNA的降解有 控作用 。因此,运用适当的方法去验证miRNA 以下两种观点:一种观点认为miRNA具有向导作 与靶基因的关系就显得尤为重要。目前,人们根 用,它会把需要降解的mRNA作出标记,之后运 据植物miRNA作用于靶基因的特点,建立了几种 送到普通 mRNA降解机制中。现阶段在斑马鱼 适用于植物 miRNA靶基因验证的方法。这些方 胚胎以及线虫的研究中支持此观点;另一种观点 收稿 日期:

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