HPLC法测定皮肤丸中盐酸小檗碱的含量论文.docVIP

　　HPLC法测定皮肤丸中盐酸小檗碱的含量论文 罗亦芬，程艳阳，谢友莲，黄爔乐，陈欣瑜 【摘要】 目的 建立皮肤丸中盐酸小檗碱的含量测定方法。方法 采用HPLC法，色谱柱为alerials XBC18柱，乙腈0.02 mol·L-1磷酸溶液(体积比25∶75)为流动相，流速为1.0 mL·min-1.freel，柱温为35 ℃。结果 盐酸小檗碱的质量浓度在3.814～38.14 μg·mL-1范围内与峰面积线性关系良好;平均回收率为99.1%，RSD为0.8%(n=9);最低检测限为0.942 7 ng。结论 本方法操作简便、结果准确，能有效地控制该制剂的质量。 【关键词】 皮肤丸;盐酸小檗碱;高效液相色谱法 Abstract:Objective To establish an HPLC method for determining the content of berberine hydrochloride in Pifu pills. Methods A aterials XBC18 column ple by using acetonitrile0.02 mol/L phosphoric acid solution(25∶75)as mobile phase. The floL/min and detection . Results The standard curve for berberine hydrochloride L. The average recovery ethod ple,accurate and reliable for the quality control of Pifu pills. Key L含8 μg的溶液，即得。 2.2 供试品溶液的制备 取本品粉末(过三号筛) 约1 g， 精密称定， 置50 mL容量瓶中，加1%(体积比)盐酸甲醇溶液约40 mL，超声处理(功率300 alerials XBC18为色谱柱;以乙腈0.02 mol/L磷酸溶液(体积比25∶75)为流动相;检测波长为424 nm。分别精密吸取缺关黄柏阴性对照溶液、对照品溶液与供试品溶液各10 μL，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，见图1。结果表明：阴性对照不干扰，理论塔板数按盐酸小檗碱计算为10 412，相邻两峰的分离度为2.26，拖尾因子为0.89。 2.5 线性关系考察 取盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，用1%(体积比)盐酸甲醇溶液制成每1 mL中分别含含3.814、7.628、19.07、30.51、38.14 μg的溶液，分别精密吸取10 μL，注入液相色谱仪，按“2.4”项下的方法测定，以质量浓度(ρ)为横坐标，峰面积(A)为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程： A=8.73613ρ-0.0511939，r=0.999 9(n=5) 结果表明盐酸小檗碱的质量浓度在3.814～38.14 μg·mL-1范围内与峰面积线性关系良好。 2.6 精密度试验 取同一对照品溶液(38.14 μg·mL-1)，重复进样6次，结果盐酸小檗碱平均峰面积为332.447 75，RSD为0.16%(n=6)。 2.7 重复性试验 取同一批样品(批号LB0024)6份，按“2.2” 项下方法制备供试品溶液6份，按“2.4”项下的方法测定，结果盐酸小檗碱的平均含量为0.446 7 mg·g-1，RSD为1.7%(n=6)。 2.8 稳定性试验 取同一份供试品(批号LB0024)溶液，分别于0、2、4、7、24 h按“2.4”项下方法，测定峰面积，结果其RSD为1.2%(n=5)，表明供试品溶液在24 h内稳定。 2.9 加样回收率试验 取已知含量的样品(LB0038)粉末1 g，精密称定，共9份，分别置50 mL容量瓶中，分别精密加入盐酸小檗碱对照品溶液适量，按“2.2”项下方法制备，依法测定，结果见表1。表1 盐酸小檗碱加样回收率试验测定结果 2.10 样品测定 取皮肤丸3批，按“2.2”项下方法制备供试品溶液，按“2.4”项下色谱条件进行测定，计算。结果3个批号的样品中盐酸小檗碱含量分别为0.446 7、0.501 7、0.569 9 mg·g-1。 3 讨 论 3.1 波长选择 取对照品溶液(38.14 μg·mL-1)于200～500 nm波长范围内扫描，结果盐酸小檗碱在230、266、347、424 nm处有最大吸收。分别选择266、347、424 nm作为检测波长进行试验，以266、347 nm作为检测波长时灵敏度较高，但空白溶液有干扰;以424 nm作为检测波长时可有效消除干扰，检测灵敏度也达到检测要求，故选择424 nm作为检测波长。 3.2 流动相的选择 分别