HBV基因分型与病毒载量及血清标志物关系的探讨论文.docVIP

　　HBV基因分型与病毒载量及血清标志物关系的探讨论文 曹军皓，赵冰红，叶彬，黄前川 【摘要】 目的 探讨HBV基因型与HBVDNA水平及血清标志物的相关性。方法 选择125例乙肝患者血清HBVDNA复制阳性的标本分别检测HBV病毒基因分型、HBVDNA、乙肝血清标志物、谷丙转氨酶(ALT)和总胆红素(TBL)。结果 125例HBVDNA复制阳性标本中HBV基因分型以B型为主占71.2%（89/125），C型占24.0%（30/125），BC混合型占2.4%（3/125），非B非C型占2.4%（3/125）；B基因型患者血清ALT（297.3±193.6）U/L和TBL（105.1±59.7）mol/L水平高于C基因型患者ALT（158.1±107.5）U/L和TBL（53.1±22.7）mol/L，P 0.01；B基因型患者血清抗HBe阳性率91.0%(81/89)显著高于C基因型的23.3%(7/30).freelL与C型(6.01±1.91) log10copies/mL无差异（P 0.05）。结论 本地区HBV病毒基因型以B型为主，C型次之，B基因型对肝脏损害较C基因型重，并与HBV载量及HBeAg系统具有相关性，B基因型易发生YMDD突变。 【关键词】 基因分型；HBVDNA；HBeAg/HBeAb；血清标志物 Abstract: Objective To study the relationships among HBV genotype, level of serum HBVDNA and HBV markers in patients samples 125 HBVDNA positive patients and HBV genotyping, HBVDNA，ALT, TBL and HBV serum markers ixed genotype (B+C)，and 2.4%（3/125）inant HBV genotype in the local area is genotype B. pared pair liver and is liable to induce YMDD mutant, in，离心10 min，及时分离血清冻存于－40 ℃冰箱中待检测。 1.2 方法 1.2.1 HBV血清学分型 采用荧光PCR法，试剂盒由上海复星公司提供，按说明书处理标本及配制反应体系后分别加入B型、C型荧光探针，PCR扩增程序为：50 ℃，2 min→94 ℃，5 min→（93 ℃，15 s→60 ℃，45 s）循环40次，以Ct值判断乙型肝炎病毒的基因型（表1）。表1 乙型肝炎病毒的基因型结果判断标准（略） 1.2.2 HBVM血清标志物的检测 采用ELISA法检测，试剂购自上海科华生物技术有限公司，按说明书操作。 1.2.3 ALT、TBL的检测 使用美国生产Beckman Coulter Unicel D×C8000全自动分析仪测定，试剂由上海复星长征医学科学有限公司提供。 1.2.4 HBV血清YMDD突变检测 采用荧光PCR法，试剂盒由上海复星公司提供，按说明书处理标本及配制反应体系后分别加入C、V、I荧光探针，各代表着YMDD野生株、YVDD突变、YIDD突变，PCR扩增程序为：50 ℃，2 min→94 ℃，5 min→（94 ℃，20 s→53 ℃，30 s）循环40次，以Ct值判断YMDD的突变类型（表2）。表2 YMDD突变结果判断标准（略） 1.2.5 统计方法 组间比较采用方差分析或t检验，P 0.05具有统计学意义。 2 结果 2.1 HBV基因分型结果 125例标本中HBV基因分型以B型为主，占71.2%（89/125），C型占24.0%（30/125），BC混合型占2.4%（3/125），非B非C型占2.4%（3/125），因BC混合型和非B非C型各仅3例，只将B型和C型病例进行比较研究。 2.2 HBV基因型临床资料比较 B基因型血清ALT、TBL水平，HBeAg和HBeAb阳性率与C基因型存在显著差异（P 0.01），HBVDNA水平差异不显著（P 0.05），见表3。 表3 HBV基因型临床资料（略） 2.3 B基因型HBVDNA水平与HBeAg系统、TBL、ALT的相关性 66例高复制组（5.0～8.0 log10copies/mL）与23例低复制组（3.0～5.0 log10copies/mL）HBeAg系统、TBL、ALT存在显著差异（P 0.01），见表4。表4 B基因型HBVDNA水平与HBeAg系统、TBL、ALT的相关性（略） 2.4 B基因型HBVDNA水平与YMDD突变 66例B