中药复方对猪热应激时脾脏中IFNγ、IL4水平的影响.pdfVIP

中药复方对猪热应激时脾脏中 IFN一弧IL一4水平的影响 陈韩英1 刘丽梅2刘风华3 陈琳2王瑞海2朱晓宇3许剑琴1 (1中国农业大学动物医学院，北京海淀100094； 2中国中医研究院基础理论研究所，北京东城100700； 3北京农学院动物科学系，北京昌平102206) 摘要采用EusA法测定了热应激时猪脾脏中IFN一1、儿一4水平的动态变化，探讨中药复方的调节作 用。高温对照组IFN一*几一4水平均上升；中药复方I组IFN一在第3天与高温对照组相比显著升高，IL一4 在第1乏与高温对照组比较显著降低；中药复方Ⅱ组IL一4在第1、3天与高温对照组相比显著降低。结果表明 燕应教能够显著提高猪脾脏中IFN一1、IL一4的水平；中药复方I和中药复方Ⅱ可显著调节熟应激所致的猪脾 脏中IFN一吼IL一4水平的改变，使机体的免疫功能趋于正常。 关键词热应激猪脾脏ⅢN一1几一4中药复方 热应激是指当环境温度超过动物等热区中舒适区上限临界温度时，动物所产生的非特异性反应应 答的总和…。猪热应激时，通过改变自身的各种生理和生化反应实现对高热环境的适应，必然会导 致其生产性能，免疫功能的下降”o。目前国内外对热应激的研究多集中在热休克蛋白(HsPs)上”J， 有关热应激对机体细胞免疫和体液免疫相关因子有何影响还鲜有报道。IFN一1、IL一4作为重要的 1111／n】2型免疫相关因子，在一定程度上能够反映出机体细胞免疫和体液免疫的基本状况”1。本文欲 从研究热应激对猪脾脏中IFN一1、IL一4水平的影响及中药复方对其的调控作用，探讨热应激对机体 免疫功能的影响和中药复方的调控效果。为研发抗热应激和调节机体免疫功能的中药添加剂奠定理论 基础。 1材料和方法 1．1试验动物 “头3月龄中国试验用小型猪(cEMP，农大I型)，购自中国农业大学实验猪场。 1．2中药添加剂 中药复方I由藿香、苍术、黄柏、石膏按1：1：1：l组成；中药复方Ⅱ由藿香、苍术、黄柏、 石膏按l：l：1：o．5比例组成，自制合剂。 1．3主要试剂和仪器 本实验在中国农业科学院北京畜牧兽医研究所国家重点开放实验室—人工气候室进行。 B10一RAD680型酶标仪(USA)。 IFN一|v和IL一4EⅡsA检测试剂盒均购自美国ADI册RAMDIAGNODllC实验室。 凯基全蛋白提取试剂盒(南京凯基生物科技发展有限公司)，考马斯亮兰蛋白定量试剂盒(南京 c咖。 作者简舟：胨韩英(1976一)．女，博士生．研究方向：从事中西兽医结合研究．E—md：limdIⅢ哪“g@126 通讯作者：许剑犟，E一皿日丑：iqim眦u@l矩∞“；刘凤华．E一珊丑：u出r曲吐1209@126．∞m。 ·313· 箍堑苒与饲科研究避展 建成生物工程研究所)。 1．4试验方法 64头猪随机分成四组，每组为16头，分别为常温对照组、高温对照组、中药复方I组和中药复 方Ⅱ组。中药复方I组和中药复方Ⅱ组猪饲料中按O．3mg／k昏bw比例分别添加中药复方I和中药复 方Ⅱ；常温对照组和高温对照组饲喂常规饲料，在23℃下饲养。 试验期10d，在人工气候仓内进行，由计算机控制模拟夏季炎热气候，温度于26—40℃下24h循 环变温，40℃时维持4h，相对湿度65％±5％。在热应激的第1、3、6、10 h后 d，40℃高温持续4 立即将猪麻醉后宰杀，取出脾脏，置一80℃下保存，备用。 样品处理：称取脾脏组织100mg，加入ld全蛋白抽提液(1IIll冷的裂解缓冲液LysisBLI如r中加 入5一磷酸酶抑制剂、I“蛋白酶抑制剂、5山苯甲基磺酰氟(PMsF)，混匀于冰上保存．匀浆15 次，取匀浆液于10000rpm离心5min后吸取上清液置一80℃下保存，备测。 采用考马斯亮兰法测定各组样品中总蛋白含量，EusA法