盐酸小檗碱对糖尿病大鼠合并系统性白念珠菌感染的实验研究.pdfVIP

前 言 近年来，糖尿病（diabetes mellitus,DM）的患病率不断上升，据WHO预测， 到2025年全球DM患者将增至3亿。与DM相关的慢性并发症已成为患者致残、致死 [1] 的主要原因 。DM合并真菌感染患者临床上常见，随着广谱抗生素、糖皮质激素、 免疫抑制剂、放化疗的广泛应用，条件致病真菌感染逐渐增多，其中以白念珠菌 感染最为突出。而抗真菌药物的频繁使用使得真菌耐药问题日益严峻，白念珠菌 [2] 耐氟康唑(fluconazole,FCZ)最为常见 。由于化学合成新抗真菌药物的研发周 期长，毒性作用以及副反应大，从植物药中寻找广谱、高效、低毒、经济的抗真 [3] 菌新药已成重要的研究方向 。传统中医中药历史悠久，在DM及其并发症的预防 和治疗中疗效肯定优势明显, 其中有很多经典药物的新的药理作用不断被发现， 已成为目前国内外糖尿病研究和药物开发的热点之一。 传统清热药黄连，性寒味苦，入药用已有两千多年的历史, 被《神农本草经》 列为“草之上品”。盐酸小檗碱（berberine,BBR）是从黄连中提取的一种黄色 [4，5] 苄基异喹啉生物碱，一直被用于治疗肠道感染，近年来有研究 发现BBR具有抗 念珠菌活性，与氟康唑或特比萘芬联用可产生体外协同作用，因为其独特的抗真 菌作用靶点，而有希望用于耐药真菌特别是耐药白念珠菌的治疗。 近年来，随着现代检查手段的应用，糖尿病的发现大大提前，80% 以上都没 有 “三多一少”的典型 “消渴”症状, 饮食不节，过食肥甘而导致中医“痰湿” 证者明显增多。“痰湿”与消渴发生发展变化关系极为密切，是导致DM的发病基 础，也是导致DM众多合并症的主要原因。这与盐酸小檗碱具有清热燥湿，泻火解 [6] 毒的功效，可用于治疗DM不谋而合，现代国内外研究 发现BBR确实具有降血糖、 调血脂作用。 本课题开展两部分研究：一、体外药敏试验：采用美国国家临床实验室标准 [7] 化委员会(NCCLS)制订的M27-A 方案中的酵母菌微量稀释法 ,测定盐酸小檗碱、 氟康唑、盐酸小檗碱联合氟康唑对临床分离30 株白念珠菌的抗菌活性。二、动 物实验：建立糖尿病合并系统性白念珠菌感染大鼠模型后，分组监测空腹血糖、 肝肾功能、血清TNF-α、肝肾组织的真菌菌落形成单位及病理PAS 染色的变化， 以验证盐酸小檗碱的降糖、抗真菌协同作用，为盐酸小檗碱的临床新应用提供实 验室依据，对糖尿病合并系统性白念珠菌感染的治疗提出新思路。 1 万方数据 第一部分 体外药敏实验 一、材料与方法 （一）实验材料 1．抗真菌药物 1．1 药物来源与性状 所用抗真菌药物采用原料药粉末和标准品。 氟康唑：上海三维康制药有限公司，批号：200707005，纯度：99.95% 盐酸小檗碱：购于中国药品生物制品检定所，批号：110713-200609，纯度：98.1% 1．2 药粉称重 体积（ml ）×浓度(ug/ml) 重量(mg)= ————————— 生物活性度(ug/mg) 1．3 药