普通肝素雾化吸入对急性肺损伤大鼠肺泡局部凝血及纤溶的影响.docVIP

普通肝素雾化吸入对内毒素肺损伤大鼠肺泡局部凝血及炎性反应影响的研究 研究背景： 急性肺损伤（acute lung injury，ALIintensive care unit，ICU）常见的临床综合征，其病理生理发展过程的严重阶段即为急性呼吸窘迫综合征（acute respiratory distress syndrome，ARDSALI/ARDS在脓毒症（sepsis）患者中最为多见，发生率可达40﹪[1]，并且对危重症患者的预后有着非常严重的影响，死亡率高达40﹪—60﹪[2]。ALI/ARDS早期病理生理变化的主要特征是肺泡-毛细血管膜通透性增加、通气/血流比值失调、表面活性物质失活和肺顺应性降低。 除此之外，近些年的研究发现在肺泡局部还存在以凝血、抗凝与纤维蛋白溶解异常改变为特征的凝血病。其主要表现为凝血亢进、抗凝和纤溶活性受抑制以及纤维蛋白过量沉积，而肺泡的纤维蛋白沉积已成为ALI/ARDS和肺部感染的重要特征[3][5]。 肺泡局部凝血的激活 有证据显示脓毒症时凝血的激活主要是通过组织因子（TF）启动的[6, 7]。正常情况下，仅有少量TF暴露于血液循环，但脓毒症时由于血管壁完整性受到破坏，内毒素、补体以及白细胞介素-6（IL-6）等促炎因子诱导内皮细胞和循环血细胞表达TF[8, 9]，使得TF大量增加并接触到了血液。TF能结合F）Ⅶ因子，使其成为FⅦa因子，TF-FⅦa复合物再激活下游的凝血级联反应，最终活化凝血酶。然而，除促凝外Welty-Wolf等在灵长类动物的脓毒症实验中发现TF-FⅦa复合物还能促进ALI等器官损伤的发生[10]。更有研究证实TF-Ⅶ因子途径介导了肺炎时肺泡内凝血酶的活化[11]。凝血酶的主要功能是水解纤维蛋白原使其转变为纤维蛋白。虽然纤维蛋白是修复和正常创伤愈合过程中所必需的物质，但它在血管外持续、过量的沉积则会产生众多有害效应。纤维蛋白能交联表面活性物质并使其失活，造成肺泡萎陷和肺顺应性降低。它和其降解产物还具有很强的趋化作用，可增强中性粒细胞向肺部聚集，并增加肺血管通透性、影响炎症细胞的迁移和增殖[12]。 由于局部天然抑制因子的产生使得抗凝系统难以对抗增强的促凝活性。蛋白C（PC）系统是人体内主要的内源性抗凝系统，活化蛋白C（APC） [12]。纤溶酶原激活剂可活化纤溶系统溶解已形成的血凝块，纤溶酶原激活抑制因子-1（PAI-1）是其主要的内源抑制剂。ALI/ARDS病人纤溶酶原激活剂和PAI-1的失衡造成了抗纤溶活性增强引起纤溶抑制造成肺泡腔内的纤维蛋白无法被溶解，而持续大量堆积。 凝血因子和炎症介质间有广泛的相互作用，可互相调节[13]。肺内的凝血异常也会促进局部的急性炎症反应。纤维蛋白本身就具有促炎特性，可促使炎症细胞聚集和炎症因子释放。另外，Ⅹa和TF-Ⅶa（PAR）sepsis时全身血管内发生的凝血异常类似。 因此，通过调节凝血和纤溶系统的异常来肺内纤维蛋白的成为治疗AL I/ARDS的。BAL）中就经常能够见到在促凝血活性增强的同时会出现纤溶活性下降。在各种ALI动TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）促炎过TF激活凝血，并刺sepsis的ALI动物实验研究探讨普通肝素局部大剂量改善肺内凝血异常及炎症反应的。 Wistar大鼠只，雄性，体重200-250g。采用静脉注射大肠杆菌脂多糖（LPS）的方法制备ALI模型经尾静脉注射LPS按7mg/kg计算用量。 实验流程 大鼠随机分为组按腹腔注射麻醉盐水灌入后停留30 s 检测指标 凝血指标thrombin-antithrombin complexes，TA 纤溶指标 ELISA法检测肺泡灌洗液中的纤溶酶原激活剂（plasminogen activator activity， 参考文献： Hudson LD, Milberg JA, Anardi D, et al. Clinical risks for development of the acute respiratory distress syndrome. Am J Respir Crit Care Med. 1995; 151: 293-301 Ware LB, Matthay MA. The acute respiratory distress syndrome. N Engl J Med. 2000; 342(18): 1334-49 Schultz MJ, Haitsma JJ, Zhang H, et al. Pulmonary coagulopathy as a new target in therapeutic studies of acute lung injury or pneumonia—a review. Crit Care Med. 2006;