盐芥ThNHX1基因的克隆及序列分析.pdfVIP

556 江苏农、 学报(Jiangsu，．o厂Agr．Sci．)，2007，23(6)：556～563 盐芥ThNHX1基因的克隆及序列分析 杨 平 ， 蔡小宁 ， 贲爱玲 ， 续 晨 ， 王 敏 ， WU Ya-jun (1．安徽农业大学农学院，安徽 合肥 230036；2．南京晓庄学院生命科学系，江苏 南京 211171；3．美国犹他州立大学，犹 他卅l洛根 84322) 摘要： 为研究盐生植物的耐盐机理，根据拟南芥的序列设计引物，通过I汀一PCR及RACE的方法从盐生植物 盐芥中克隆出一一个假定的Na ／H 逆向转运蛋白基因ThNHXI。该cDNA全长2 045 bp，开放读码框长度为1 638 bp，编码一个545个氨基酸的多肽。序列分析结果表明，该序列与拟南芥的Na ／H 逆向转运蛋白基因具有很高的 同源性。结构分析结果表明，ThNHX1基因与AtNHXI基因具有类似的外显子和内含子构成。系统发育分析结果表 明，该蛋白与液泡型的Na ／H 逆向转运蛋白的亲缘关系较近，与质膜型的Na ／H 逆向转运蛋白亲缘关系较远。 关键词：盐芥；RACE；Na ／H 逆向转运蛋白 中图分类号：$332．6 文献标识码：A 文章编号：2007)06—0556—08 Cloning and Sequence Analysis of ThNHX1 Gene from Thellungiella halo— phila YANG Ping ，CAI Xiao—ning ，BEN Ai—ling ，XU Chen ，WANG Min ， WU Ya-jun (1．College of Agronomy，Anhui Agricultural University，Hefei 230036，China；2．Department 0厂Life Sciences，Nanjing Xiaozhuang University，Nanjing 211171，China；3．Utah State University，logan UT 84322，USA) Abstract： To study salt—tolerant mechanism of halophyte，a full length cDNA fragment was amplified from Thellung— iella halophila with primers designed based on the Arabidops~thaliana AtNHX1 gene sequence using RT—PCR and 5 一and 3 RACE methods．The cDNA sequence was 2 045 bp in length including an open reading fiame of 1 638 bp，encoding a predicted polypeptide of 545 amino acids．Detailed sequence analysis showed that the gene shared the highest homology with AtNHX1．The cDNA encodes a putative Na ／H antiporter gene(ThNHX1)．ThNHXI had similar intron and exon structures to those of AtHNX1．The phylogenetic analysis of various Na ／H antiporters indicated that ThNHX1 was grouped with tonoplast Na ／H antiporters，and distinguished from plasma membrane Na ／H antiporters． Key words： Thellungiella halophila；RACE；Na ／H antiporter 土壤盐渍化是农业生产面临的严重的非生物逆境 计，全世界盐渍土面积约1．0×10 hm 。中国有盐渍土 之一 。据联合囤教科文组织