野生种马铃薯SpPHYB基因的克隆与表达分析.pdfVIP

1020 植物生理学通讯 第43卷第6期，2007年12月 野生种马铃薯SpPHYB基因的克隆与表达分析 张易，杨清 ，王全逸，郭建林，梁峰 南京农业大学生命科学学院，南京210095 提要：采用RT-PCR技术从野生种马铃薯中克隆到一个光敏色素基因PHYB，其eDNA全长为3470 bp。含有一个3393 bp的完整开放阅读框，编码一条长1 130个氨基酸的蛋白，分子量为125 kDa，等电点为5．6。该基因编码的蛋白序列与 栽培种马铃薯、番茄和烟草同源基因编码的氨基酸序列一致性分别为98％、95％、92％，命名为SpPHYB。半定量PcR分 析表明，根、茎、叶和芽中SpPHYB表达水平较高且相似，但在花和块茎成熟器官中表达量稍低。 关键词：野生种马铃薯；SpPHFB；克隆；表达 Cloning and Expression Analysis ofSpPHYB Gene from Solanumpinnatisectum Dunal ZHANG Yi，YANG Qing’，WANG Quan-Yi，GUO Jian—Lin，LIANG Feng CollegeofLifeSciences,NanjingAgriculturalUniversity,Nanfing210095,China Abstract：The full—length cDNA of SpPHYB gene was cloned from wild potato(Solanum pinnatisectum)by RT-PCR．ThecDNAwas 3470bplongwithallopen readingflame(oRF)of3393 bpand encoded 1 130amino acid residues with a predicted molecular weight of 125 kDa and an isoelectric point of 5．6．The protein se— quence comparison showed that the predicted protein had higher identifies tO those from Solarium tuberosum， Lycopersicon esculentum and Nicotiana tabacum(98％，95％and 92％)．Semi—quantitive RT-PCR indicated that the expression level ofSpPHYB was higher and similarin roots，stem，leaves and sprouts，and lower in flowers and tubers． Key words：So／anum pinnatisectum；SpPHYB；cloning；expression 光敏色素是植物体内感受光信号的一类大小 PHYB基因在植株体内的表达可能有调节马铃薯对 约124 kDa的光受体蛋白，包含光敏色素A、B、 光周期敏感性的作用，因而对培育栽培适应性广 C、D和E 5个成员(Nagatani等1991；Somers等 的品种似乎有一定的潜在理论和应用意义。马铃 1991；Lopez—Juez等1992)，其在植物种子萌发、 薯Solanum pinnatisectum是一个花色苷合成光敏感 幼苗生长、茎的伸长、子叶伸展、开花控制和 的野生马铃薯，用其研究马铃薯中光信号转导可 花色苷合成等生长发育过程中均起作用(Furuya 能是一个适宜的植物材料。我们以前曾从此种马 1993；周波和李玉花2006)。光敏色素B(PHYB) 铃薯中克隆了PHYA基因(张易等2006)，本文报 参与植物开花调节和对光周期的识别，虽然迄今 道克隆PHYB基因的结果。 为止与其相关的机制还不很清楚(Thiele等1999； 材料与方法 Scohfield和Paliyath 2005)，但近年来有报道认 为，PHYB的表达受抑制后，无论在短日照还是 野生种马铃薯(Solanum pinnatisectum Duna1) 长日照条件下马铃薯均能结薯，而作为短日照植 由美国国家马铃