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荧光光度法测定鸟嘌呤 刘美林，李保新，许春丽，章竹君’ 陕西师范大学化学与材料科学学院，陕西西安710062 摘要本文研究表明在碱性介质中，鸟嘌呤可被H2q氧化(Cu2+作催化剂)生成8一羟基鸟嘌呤，该产物在 397 nrn处产生强的荧光。据此，建立了一种测定鸟嘌呤的新方法。鸟嘌呤的浓度在2．0×lO-。～1．0×10一g ·mL一的范围内与荧光强度有良好的线性关系，检出限为8．0×10。89·rnL～。该方法简单、快速、灵敏度 高，并成功地用于尿样中鸟嘌呤的测定。 主题词荧光光度法；鸟嘌呤；过氧化氢 中图分类号：0657文献标识码：A 文章编号：1000一0593(2003)05—10i2—03 1mL mLO．1mol·L1 2mol-L叫氢氧化钠溶液，5 H202，4 引 言 mL0．01 g·rnL叫硫酸铜溶液，充分振荡。反应5蛐n后，用1 鸟嘌呤是种含有稠合嘧啶和咪唑环的杂环化合物，大 nm ∽荧光皿，入射狭缝、出射狭缝带通均为10Ⅲ，用2lO 量的嘌呤类化合物已经被研究开发为有效的化学治疗药物。 波长的光激发，在397rm波长处测定荧光强度。 因而．检测鸟嘌呤在生物分析中具有十分重要的意义。目前 测定鸟嘌呤方法有高教液相色谱法12、气相色谱一质谱 2结果与讨论 法”、毛细管电泳法47、电化学{去8”o和光度法‘“J。而用荧 光分光光度法测定鸟嘌呤的报道仅有一篇“…，在pH4．O时 2．1 N帕H浓度对荧光强度的影响 用苯甲酰甲醛与鸟嘌呤反应衍生后进行荧光测定。本文研究 在本体系中，NaOH既是氧化反应介质．又是荧光介质， 发现在碱性介质中，cu”催化作用下鸟嘌呤可被H202氧化 其浓度对本体系的影响很大。故本文详细地研究了NaoH浓 生成8．羟基鸟嘌呤”1，丽8．羟基鸟瞟岭在397m处产生强 度的影响。实验结果表明：在0．01～0．04 nd·L’1的范围 的荧光。据此，建立起了一种测定鸟嘌呤的荧光分析新方 内，体系的荧光强度随Na0H浓度的增大而增强；当NaO¨ 法，，该方法简单、快速，灵敏度高。 浓度高于0．04rrd·L。1时，体系的荧光强度反而减低(见图 04 1)。所以，本文选择NaoH浓度为0nd·L～。 1实验部分 1．1仪器与试剂 RF。540型荧光分光光度计(日本，岛津)， 0500 鸟嘌呤(美国，s-g【I“t公司)储备液：准确称取Og ∞鲫∞如∞o 鸟嘌呤，用水溶解后，定量转移到500 ∞u；∞*￡星∞^I互墨 士置q目∞芑_ mL的容量瓶中，配制 、。．，。．．．，。●．L0 垒 l×10 C0ncentranon0fNaOH血nolL“ g-ml。1的储备液，用时逐级稀释，在4℃冰箱中保 of 存。30％H，0