高效液相色谱法测定覆盘子没食子酸的含量.pdfVIP

2007年l2月 高效液相色谱法测定覆盘子没食子酸的含量 93 高效液相色谱法测定覆盘子没食子酸的含量 平欲晖 (江西中医学院南昌330000) 摘要：研究采用反相高效液相色谱法测定覆盆子中没食子酸的含量。色谱条件：色谱柱 C18柱(DiamonsilTM 20 mm x5 mm，5ixm)，流动相采用甲醇：0．5％的磷酸溶液(10：90)，检 测波长为273 nm，柱温25E，进样量20 ，流速0．8 ml／min，经方法学考察，线性关系良 好，r=0．9990，回收率达99．4％。 关键词：覆盆子 没食子酸 含量测定 中药覆盆子为蔷薇科悬钩子属植物掌叶覆盆子 EasyGuard C18柱(5 ixm，8 mm×4 mm)，流动相采用甲 (Rubus chingi)的未成熟果实，因其分布区域仅在华东 醇：0．5％的磷酸溶液(10：9o)，检测波长为273 nm，柱 地区也称华东覆盆子，因叶裂如掌亦称掌叶覆盆子。 温25℃，进样量20 ，流速0．8 ml／min，理论踏板数按 别名对头苗、大号角公、树莓、牛奶母、大麦泡等…_2 J。 没食子酸峰计不得小于2000。对照品溶液和供试品溶 性微温，味甘酸，具有补肾固精、补肝明目之功效，用于 液分别进样20 ，用外标法对没食子酸进行定量测 肾虚遗尿、小便频数、阳痿早泄、遗精漏精等症的治 定。 疗_3 J，尚用于食疗和保健。覆盆子中的化学成分种类 2．4 检测波长的确定 取对照品溶液、供试品溶液在 很多，有糖类、有机酸、维生素、氨基酸和丰富的微量元 200—700 nlflti进行波长扫描，结果对照品溶液和供试品 素、挥发油、黄酮、鞣质、生物碱、黄酮及苷、香豆素、蒽 溶液在273 nm处均有吸收峰，且稳定性较好，故选择 醌、甾醇、萜类物质 J，都具有相应的生理活性。其中 273 nm作为测定波长。 没食子酸具有抗菌抗病毒、抗肿瘤的作用 J，是覆盆子 2．5 提取溶剂的选择 取覆盆子样品粉末1 g，选用 中的一个活性成分，该药材中没食子酸的含量测定还 甲醇、70％乙醇、70％甲醇为溶剂，按实验方法处理，分 未见报道。因此，研究采用高效液相色谱法测定覆盆 别于波长273 nm测定吸收值，70％乙醇和70％甲醇提 子中没食子酸的含量，可作为控制覆盆子质量的一项 取的样品液干扰多，在适当改变条件后，仍不能达到有 指标。 效分离，故选择甲醇作为黄酮测定的提取溶剂。 1 试剂、设备 2．6 提取时间的确定 按提取方法，以甲醇为提取溶 1．1 试剂 磷酸，甲醇，分析纯，上海试剂一厂；甲醇， 剂，精密称取3份同一样品各1 g，除超声时间分别按为 色谱纯，禺王试剂厂；没食子酸对照品(含量测定用)， 20 min、30 min、40 min外，均按样品处理方法操作，结 批号：1 10831—200302，中国药品生物制品检定所 果表明，超声20 min的单位样品溶液峰面积与超声30 1．2 设备 粉碎机：型号PZY150 290，上海中药机械 min、4o min单位样品溶液峰面积相差较大，而后两者 厂；电子天平：BS2000S型，赛多利斯(中国)公司；超声 很接近，RSD小于2％。 清洗器：KQ一250，昆山市超声波仪器有限公司；紫外可 见分光光度计，贝克曼；高效液相色谱仪，安捷伦1100， 美国惠普公司 2 方法与结果 2．1 对照品溶液的配制(20 g／m1)精密称取用五氧 化二磷真空干燥至恒重的没食子酸对照品适量于10 rnl容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度。精密吸取该 溶液2 ml于100 ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，即 得。