荧光抗体技术在猪瘟净化中的应用.pdfVIP

·78 · Ani mal Husbandr yVet er i nar y Medi c i ne 2008 V01 ．40 No ．9 荧光抗体技术在猪瘟净化中的应用 墓 喜 ：羹 何若钢，张文明，段福君， 圈 张传涛，李秀宝 ( 广西大学动物科学技术学院，广西南宁530005 摘要 ：荧光抗体技术( FAT 是一种灵敏而又特异 的诊断方法，被世界各国作为猪瘟的法定诊断方法 。采用FAT对猪瘟病毒进行控制和净化 ， 其方法简单、快速、技术可靠 。检测成本相对较低。2005—2007年笔者采用FAT对规模化猪场猪瘟进行2—3次净化 ，可以稳 定地控制猪瘟．使 猪瘟的阳性率下降至3 ％左右，大大降低了各阶段 猪群的死亡率，并明显提高了母猪的繁殖性能，取 得了良好的经济效益。 关键词 ：荧光抗体技术；猪瘟；检测；净化 中图分类号：$852．5 文献标识码：B 文章编号 ：0529-5 130( 2008 09—0078 ．03 猪瘟是一种早已被人们熟知的疾病，由于其对猪 2试验方法 的危害大，世界动物卫生组织( OI E 将本病列入通 报疫病，属 国际重要 的检疫对象。我国十分重视猪瘟 2 ．1采扁桃体 的防疫工作 ，尤其在规模化猪场对猪瘟的疫苗接种是 用1％的Na OH溶液消毒30 s 以上并经清洗过 的 防疫 的重点，并取得 了明显 的成效 ，典型的猪瘟已经 采样枪刺入上颚后沿部的扁桃体( 任何一侧 ，扣动 很少发生⋯ 。然而，近几年来非典型性猪瘟( 或慢 板机 ，采下黄豆大小 的样品。将采下的扁桃体组织用 性猪瘟 卷土重来，并在较大范围内蔓延传播。因 一次性竹签拨进小的离心管并密封 ，置一15 ℃至一 此，控制和净化非典型猪瘟成为当前养猪业 的一项重 20 ℃冰箱中速冻。在管的外壁写上编号，立即送实 要任务。 验室检测。 2 ．2荧光抗体试验检测操作 1试验时间和动物 将采到的扁桃体进行抹片。触压在洁净无划痕 的 2005—2007年在广西选择5个规模化猪场，基 载玻片上，触片时，尽量不要重叠，以1—2层细胞 础母猪分别为：A场1 450头，B场520头，c场42 5 为宜。触片在室温中 自然干燥 。固定用4℃分析纯丙 头，D场1 140头，E场650头。 酮 固定3—5 mi n 。固定后用pH 7．2 PBS轻轻漂洗， 在室温中自然干燥。染色取 已固定 的触片，滴加猪瘟 收稿 日期：20 07 - 11- 12 荧光抗体染色试剂，以染色剂覆盖触膜为宜 ，平稳地 作者简介：何若钢( 1957 一 ，男，副教授。 抑制胸腺嘧啶核苷酸合成酶 ，从而抑制DNA的合成 ， 参考文献： 而对RNA病毒没有或仅有极低的抑制作用 。FUdR 在抑制DNA病毒的DNA合成的同时，对细胞也有一 [ 1] Naz eri an K and Fadl y AM．Pr opagat i on o f v i ru l ent and a vi ru l ent 定的毒性，在组织培养系统 中通常使用不影 响组织生 t ur k ey hemor r hagi c en t er i t i s v i r us i n c