清肺化纤汤对博莱霉素所致大鼠肺间质纤维化的实验观察.pdfVIP

2008年12月第46卷第34期 ·中医中药 · 清肺化纤汤对博莱霉素所致大鼠肺问质纤维化的实验观察 王增祥 庞彩苓 于金源 (山东省潍坊市中医院呼吸科，山东潍坊261041) [摘要】目的 研究清肺化纤汤对大鼠肺间质纤维化形成过程中的治疗作用。方法 将90只大鼠随机分成4组 ：空白组、模型 组、清肺化纤汤组、强的松组。气管内滴注博莱霉素复制肺纤维化动物模型，造模后第 2天开始给药，分别在7d、14d、28d各 处死7只，取肺组织进行病理组织学观察、形态定量分析、免疫组化以及ELISA法测定肺泡灌洗液中TGF_B1蛋白水平。 结果 清肺化纤汤通过抑制肺组织中的TGF—B1水平从而对大鼠肺纤维化进行有效治疗。结‘论 清肺化纤汤具有较好的抗 肺纤维化作用。 [关键词】清肺化纤汤；肺纤维化；TGF—B1 中【图分类号】R一33 文【献标识码】A厂．f‘文章编号】1673—9701(2008)34—77—02 肺间质纤维化早期以肺泡炎为主，包括多种细胞因子的渗 机自动测算出以上三个部分所 占的面积，取其平均面积。(3)免 出和大量炎性细胞的浸润，后期成纤维细胞大量增生 ，胶原沉 疫组化：采用链霉素抗生物素蛋白一过氧化酶 (sP法 ，美国 积，逐渐发展为不可逆的肺间质纤维化。清肺化纤汤(黄芩、虎 Zymed公司即用型试剂盒SP一9001)。用真彩色图像分析仪测定 杖、山慈菇等组成)系临床经验方，对慢性咳嗽有较好的临床疗 阳性细胞的平均吸光度值 (IA)来定量反映TGF_B1的表达强 效。本实验研究清肺化纤汤对实验性肺纤维化模型的影响，观察 度。(4)TGF—B1蛋白水平测定 ：BALF上清液5mL行酶联免疫检 其对肺纤维化的疗效并探讨其机制。 测法(ELISA)，采用双抗体夹心ELISA法 ，根据试剂盒提供的方 法反应，终止反应后用酶联仪测450nm光密度 (OD)，结果与标 1 材料与方法 准曲线比较确定TGF—B1含量。 1．1 一般资料 1．2．3 统计学方法 通过方差检验来 比较有不同组别肺组织中 1．1．1动物 健康 sD雄性大鼠90只，体重 140—160g，山东中 TGF—B1的表达。以P0．05作为具有统计学意义的界限。 医药大学实验动物中心提供。 1．1．2 药物 清肺化纤汤方中生药购 自潍坊市中医院中药房， 2 结果 水煮醇提制成2g／mE生药备用；博莱霉素A5购 自制药厂；强的 2．1 肺病理形态学变化 松购 自制药厂。 2．1．1 肉眼观察肺组织外观形态 空白组双肺呈淡红色，表面 1．1．3 主要试剂及仪器 TGF—B1试剂盒购 自深圳晶美工程 光滑，灌洗时弹性好。模型组 14d、28d时大鼠双肺体积略缩小， 有限公司，选用48孔、免疫组化试剂盒 ，购 自上海基因工程有 质地硬 ，颜色暗红，表面粗糙不平，可见小片状、凹凸不平的苍白 限公司。 灶，灌洗时弹性减弱，部分体积缩小。清肺化纤汤组、强的松组肺 1．2 方法 颜色略暗，表面稍粗糙，触之弹性尚好，体积无明显缩小。 1．2．1 动物分组及处理 肺问质纤维化模型复制：博莱霉素大 2．1．2 病理检查 结果表明，清肺化纤汤组在造模后 7d、14d、 鼠肺间质纤维化模型与人类相似，成为国际上普遍采用的方法。 28d肺组织炎性细胞浸润较模型组均明显减少，与强的松组比较 方法为大鼠腹腔注射戊巴比妥钠45mg／kg麻醉后，气管内给予 差别不大；纤维结缔组织增生程度较模型组亦轻。 BLMA5。将大鼠随机分成4组 ：空白组、模型组、清肺化纤汤组、 2．1．3 各组大鼠肺组织免疫组化病理分析 各组大 鼠肺组织 强的松组，每