利用制胶废水生产5-氨基乙酰丙酸的发酵条件研究.pdfVIP

第 2l卷第 2期 海南师范大学学报 (自然科学版) Vo1．21 No．2 2008年6月 Journal of Hainan Normal University(Natural Science) Jun．2008 利用制胶废水生产5一氨基乙酰丙酸 的发酵条件研究 朱春节，谢秀祯，王小明，黄循吟 ，覃绪林 (海南师范大学生物系，海南 海口571158) 摘 要：利用制胶废水作为营养物对类球形红细菌突变株A5产ALA的发酵条件进行了初 步优化，结果表明在体积分数为80％制胶废水中添加终质量浓度为4 g／L的废糖蜜作碳源，接种 量为10％。装液量为20 mid100mL，在180 dmin黑暗振荡培养24 h后加入终浓度为20 retool／L 的乙酰丙酸．再于100 r／min继续振荡培养24 h，ALA产量可达8．45 mg／L． 关键词：5一氨基乙酰丙酸：类球形红细菌；制胶废水；发酵条件 中图分类号：TQ 921 文献标识码：A 文章编号：1671—8747(2008)02—0184—05 5一氨基乙酰丙酸(5-aminolevulinic acid，ALA)是卟啉、血红素、叶绿素和维生素B 等四吡咯化合物 生物合成的前体物质．它作为一种无公害的绿色除草剂、杀虫剂，抗微生物药剂、植物生长促进剂以及治疗 皮肤癌、肺癌等癌症的药物，已受到国内外研究者和产业界的广泛关注…．然而，由于ALA的化学合成需 要经过多步较复杂的反应，因此直至最近，它的大量生产还非常困难．来源少、成本高已成为ALA作为商 品(特别是作为农用化学品)广泛应用的制约因素． 日本广岛大学工学部Sasaki教授领导的研究小组，根据紫色非硫光合细菌富含维生素B ：、类胡萝I- 素等生理活性物质的特点。率先进行了光合细菌产ALA的研究．他们在高产菌株选育、底物选择、ALA脱 水酶抑制剂和ALA发酵条件的优化等方面作了详尽的研究．结果发现光合细菌可以大量合成ALA并分 泌到细胞外。其中类球形红细菌(Rhodobacter sphaeroides)的ALA产量较高 ．此后，不少研究者陆续对不 同菌株的ALA合成酶、ALA脱水酶抑制剂、ALA发酵条件以及代谢调控等进行了研究 ．从目前的情况 来看。要实现ALA作为农用化学品的工业化生产，首先要解决生产成本问题，而利用廉价原料(如有机废 水)进行生产．应该是有效途径之一． 1990年Sasaki等阻 首次利用废水厌氧消化器的出水(含乙酸、丙酸等有机酸)为原料，补充甘氨酸作氮 源，接种类球形红细菌后，通过问歇地在培养液中3次添加乙酰丙酸(LA)，结果在厌氧光照(5 000 Lux)的 条件下．胞外ALA的产量达到4．2 mmol／L．Tanaka等 则在厌氧光照条件下，通过接种大量的类球形红细 菌并多次添加乙酰丙酸和甘氨酸．将废水污泥厌氧消化液中的挥发性脂肪酸转化为ALA，产量达9．2 mmol／L， 说明废水污泥产生的挥发性脂肪酸对ALA的生产是有用的．海南是我国天然橡胶的主要产地，每年排放 的制胶废水多达400万t．谢秀祯等人 的研究表明，制胶废水具有较高的可生化性，适于用光合细菌进 行生物处理．本实验以类球形红细菌突变株A5为生产菌株，利用制胶废水作营养物进行ALA发酵条件的 研究，以期探索一条工业化生产ALA的新途径，同时实现制胶废水的资源化利用，并从根本上解决制胶废 水带来的环境污染问题． 收稿日期2008-03-10 基金项目：海南省教育厅高校科研基金项目(Hjkj200412) 通讯作者 第2期 朱春节等：利用制胶废水生产5一氨基乙酰丙酸的发酵条件研究 185 1 材料与方法 1．1 菌种来源 自制胶废水中分离筛选而得，初步鉴定为类球形红细菌．经紫外线、亚硝酸和亚硝基胍诱变处理得到 A5突变株． 1．2 培养基和试剂 1)基本培养基：碳源，NaH2PO4 1．07 g，Na2HPO4 1．13 g，MgS04-7H20 0．2 g，CaC12·2H20 0．0