HPLC法测定胃炎Ⅰ号胶囊中芍药苷含量.doc

HPLC法测定胃炎Ⅰ号胶囊中芍药苷含量作者简介： 于兆云，男，（1971.03-），甘肃金昌人，金川集团公司职工医院药剂科主管药师 【摘要】目的：建立用HPLC法测定胃炎Ⅰ号胶囊中芍药苷含量的方法。方法：色谱柱为kromasil C18分析柱（250mm×4.6mm，5um）；流动相为乙腈-水（15：85）；流速1.0mL.min-1；检测波长232nm。结果：芍药苷的进样量在0.02~0.12mg/mL范围内，与其峰面积有良好的线性关系（r=0.9994），加样回收率为99.23%，RSD为0.85%(n=5)。结论：本方法效果良好，专一性强，稳定性和重现性好，可作为该制剂定量质控的方法。 【关键词】胃炎Ⅰ号胶囊；芍药苷；高效液相色谱法 慢性胃炎是指胃粘膜慢性炎性病变。慢性胃炎的特征是胃粘膜反复慢性炎症，胃腺萎缩减少，粘膜层呈特异再生性改变。临床表现以胃粘膜炎症及胃腺萎缩的病理生理为基础，发病率在消化系统疾病中列居首位[1]，且随年龄增长而增长。目前西药疗效不甚理想。胃炎Ⅰ号胶囊是根据中医药理论，在我院多年验方的基础上自行研究开发的纯中药复方制剂，对慢性胃炎、慢性浅表性胃炎、胃及十二肠溃疡等病，经临床应用效果明显。经小鼠急性毒性试验表明该药毒性小，临床用药安全。经我院药效学研究和临床观察证明，该药抗炎作用显著，且有抑制胃酸分泌、舒肝理气、镇痛等功效。 为了有效地控制其质量，我们采用HPLC法测定制剂中的芍药苷的含量。方法效果良好，专一性强，稳定性和重现性好，可作为该制剂定量质控的方法。 1 仪器与试药 岛津CBM-10A高效液相色谱仪，包括SPD-10A紫外检测器、LC-10AT二元高压泵、CTO-10AS柱温箱、LCsolution Lite工作站（日本Shimadzu公司）；AE240S型电子分析天平（梅特勒-托利多仪器有限公司）。 芍药苷对照品（HPLC级，上海源叶生物科技有限公司，批号；甲醇为色谱纯；水为双蒸水；其余试剂均为分析纯；胃炎Ⅰ号胶囊为我院自制。 2 方法与结果 2.1色谱条件 色谱柱：WondaSil Cl8柱（150mm×4.6mm，5μm），流动相：甲醇-水（30：70）；流速：1.0mL .min-1；柱温：30℃；检测波长：230nm。 2.2线性关系考察 分别精密量取对照品溶液（0.2mg/mL）1，2，3，4，5，6mL，装入10mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，分别吸取20μL注入液相色谱仪中，测定峰面积Y，将峰面积Y与芍药苷浓度X进行线性回归得回归方程Y=24.02×105X-21.41×102，r=0.9994，芍药苷浓度在0.02~0.12mg/mL范围内与峰面积有良好的线性关系。 2.3精密度试验 取对照品溶液，按上述色谱条件，重复进样5次，每次进样20μL，测定峰面积，结果RSD=0.96%（n=5），见表1。 表1 精密度试验结果（n=5） Tab 1 Results of precision test (n=5) 2.4稳定性试验 取供品溶液，按上述色谱条件，分别于0，0.5，2，4，6，8h进样，测定峰面积，结果RSD=1.01%（n=5），显示待测样品至少在8h内稳定，见表2。 表2 稳定性考察结果（n=5） Tab 1 Results of stability test (n=5) 2.5供试品制备方法的选择 白芍、赤勺中芍药苷的提取方法主要有醇提和水提两种，但因超声处理时间及次数不同，芍药苷与其他杂质峰的分离度不很理想，故对本品分别进行醇提与水提处理。结果显示，水提超声处理45min再过聚酰胺柱分离效果最好。 2.6阴性对照试验 取缺白芍、赤芍样品，按供试品溶液制备方法制备，并取适量注入液相色谱仪，结果显示在芍药苷相同保留时间处无吸收峰。对照品、样品及阴性对照品色谱图见图1 图1对照品、样品及阴性对照品色谱图 A. 对照品；B. 阴性样品；C.样品 Fig 1 HPLC chromatogram A. reference substance; B. negative sample; C. sample 2.7重现性试验 取同一批样品5份，分别精密称定，按样品含量测定方法测定峰面积并计算芍药苷含量（mg.g-1）。结果平均含量为5.7130mg/g，RSD=0.92%，见表3。 表3 重现性试验结果 (n=5) Tab 3 Results of repeatability test (n=5) 2.8回收率试验 精密称定已知含量样品5份，精密加入芍