RegⅠ-shRNA载体对胃泌素促胃癌细胞BGC823增殖作用的影响.pdfVIP

广东医学 2012年 1月第 33卷第 1期 GuangdongMedicalJourn~ Jan．2012，Vo1．33，No．1 · 65 · phatasesregulaterhofamilyGTPasestopromoteinvasionandmotili— CapcerRes，2004，10(3)：l192—1200． ty[J]．CancerRes，2006，66(6)：3153—3161． [7] WANGW，YANGLY，YANGZL，eta1．Expressionandsignifi- [3] WANGW，YANGLY，YANGZL，eta1．Elevatedexpressionof canoeofRhogeneinhepatocellularcarcinoma[J]．WorldJGas- autoefinemotilityfactorreceptorcorrelateswithoverexpression of troenteml，20o3，9(9)：1950—1953． RhoC nad indoeatespoorprognosisin hepatocellularcarcinoma f8] LIUN，ZHANGGY，BIF，eta1．RhoCisessentialfortheme— [J]．DigDisSci，2007，52(3)：770—775． tastasisofgastriccancer[J]．JMolMed，2007，85(4)：1149一 [4] HANNONGJ．RNA interference[J]．Nature，2002，418 l156． ， (6894)：244—251． [9] PILLEJY，DENOYELLEC，VARETJ，eta1．Anti—RhoAand [5] PRuI1TrLK，DERCJ．ProsnadRhoregulapionofthecellcycle anti—RhoC siRNAsinhibithteproliferation andinvasivenessof andoncugenesisl[J]．CnacerLett，2001，71(1)：1～1O． MDA—MB一231breastcnacercellsinvitronadinvivo[J]．Mol [6] IKOMAT，TAKAHASHT，NAGANOS，eta1．Adefinitiveroleof Ther，2005，11(2)：267—274． Rhocinmetastaisoforthotopielungcnacerinmice[J]．Clin (收稿 日期：2011—03—15 编辑 ：朱绍煜) RegI—shRNA载体对 胃泌素促 胃癌细胞 BGC823增殖作用的影响 程珊 ，丁一。，张钦 宪 新‘乡医学院基础 医学院组织胚胎学教研室 (河南新 乡453003)； 郑州大学基础 医学院组织胚胎学教研室 (郑州 450052) 【摘要】 目的 探讨再生蛋白I(RegI)在胃泌素刺激胃癌细胞增殖通路中的作用。方法 构建3个Reg I—shRNA表达载体 ：pSUPER—EGFP—REG／1、pSUPER—EGFP—REG／2和pSUPER—EGFP—REG／3。分别转染 胃癌细胞 BGC823，G418筛选。RT—PCR检测RegImRNA的转录水平，建立 RegI基 因表达抑制 胃癌细胞系。 MTY法检测胃泌素孵育对胃癌细胞增殖的效应。结果 pSUPER—EGFP—REG／1可有效抑制RegImRNA在胃 癌细胞 BGC823中的表达。胃泌素孵育前，RegI基因表达抑制的胃癌细胞增殖能力较无基 因表达抑制的 胃癌细 胞明显降低 (P0．05)；胃泌索孵育后，胃癌细胞的增殖能力明显增加 (P0．05)，而RegI基 因表达抑制的胃癌 细胞增殖能力无明显改变(P0．05)。结论 成功建立了RegI基因表达抑制的胃癌细胞系，RegI基因可能对 胃泌素促 胃癌细胞的增殖有促进的作用。 【关键词】 RegI基因；胃泌素；RNA干扰 胃癌是发病率与病死率都较高的一种常见恶性肿 pSUPER—EGFP—I由郑州大学组织胚胎学教研室保 瘤 ，极大地危害着人们的生命健康。胃泌素是一种胃 存。限制性内切酶 Hindm、Ec