抗氧化治疗对急性重症胰腺炎大鼠的效果及JNK活化的影响.pdfVIP

· 2142 · 广东医学 2015年7月 第36卷第 14期 GuangdongMedicalJournalJu1．2015，Vo1．36，No．14 抗氧化治疗对急性重症胰腺炎大 鼠的效果及 JNK活化的影响术 吴晓英，吴颀，詹卫华 浙江省立同德医院普外科 (杭州 310012) 【摘要】 目的 探讨抗氧化剂N一乙酰半胱氨酸对急性重症胰腺炎大鼠的疗效及JNK信号通路活化的影 响。方法 选择清洁级C57BL／6雄性 sD大鼠56只，随机分为空 白对照组 8只，开腹后仅翻动胰腺，不做任何处 理，然后立即关腹 ；胰腺炎组24只，采用 10％的L一精氨酸腹腔注射法诱导大鼠急性重症胰腺炎模型；治疗组24 只，于模型制备前30min内腹腔注射5％的N一乙酰半胱氨酸(200mg／kg)进行预处理，然后再进行急性重症胰腺 炎大鼠模型制备；胰腺炎组和治疗组选取3、6、12h3个时间点各8只分为3个小组，观察各组大鼠血清胰淀粉酶、 病理学改变、组织中磷酸化C—iLID_蛋白水平、丙二醛含量TNF—OL、IL一6的变化。结果 胰腺炎组大鼠各时间点 的各项指标明显高于空白对照组；治疗组大鼠3、6h血浆IL一6水平明显低于胰腺炎组，6、12h胰腺组织病理学 评分均明显低于胰腺炎组，其余各指标明显低于胰腺炎组 (P0．05)。结论 急性重症胰腺炎大鼠血清胰淀粉 酶、病理学及相关指标均发生了明显的改变，N一乙酰半胱氨酸通过清除氧 自由基、减少TNF一0l和 IL一6的产生 等机制对急性重症胰腺炎大鼠发挥治疗和保护作用，还通过改变组织中磷酸化 C—jliB蛋 白水平来影响JNK信号 通路的活化 。 【关键词 】 抗氧化；N一乙酰半胱氨酸；重症胰腺炎；JNK活化；丙二醛 国内外研究发现急性胰腺炎发病过程中存在氧化 N一乙酰一L一半胱氨酸 (NAC)由国内相关公司生产。 应激现象，氧 自由基发挥了重要作用；丙二醛 (MDA) 1．4 方法 实验动物在实验前 12h禁食，不禁水。 是反映脂质过氧化的敏感指标，MDA的含量可 以反映 空白对照组开腹后仅翻动胰腺，不做任何处理 ，然后立 机体 内脂质过氧化的程度，从而间接反映出细胞损伤 即关腹；胰腺炎组采用 10％的L一精氨酸腹腔注射法 的程度…。在机体氧化损伤的信号转导途径中，JNK 诱导大鼠急性重症胰腺炎模型，注射 2次 ，中间间隔 信号通路发挥了重要作用。2014年 1一_6月，本研究建 1h，每次2．0mg／g。取第2次注射后3、6、12h3个时 立急性重症胰腺炎大 鼠模型 ，观察 N一乙酰半胱氨酸 间点各8只分为 3个小组；治疗组于模型制备前 30 对急性胰腺炎的治疗效果，详细内容和结果如下。 min内腹腔注射 5％的N一乙酰半胱氨酸 (200mg／kg) 1 材料与方法 进行预处理，然后再进行急性重症胰腺炎大 鼠模型制 1．1 实验动物 清洁级C57BL／6雄性 SD大 鼠56只， 备。空白对照组和胰腺炎组注射等量生理盐水。大鼠 185～230g，由浙江省立 同德医院实验动物中心负责 注射后禁食禁水。 调剂。动物实验许可证号：SYXK(浙)2009—0122。56 胰腺炎组和治疗组在3个时间点中行腹腔麻醉 ， 只大 鼠随机分为空 白对照组 8只、胰腺炎组 24只、治 下腔静脉采血处死大 鼠，行大鼠血清淀粉酶检测。采 疗组24只，其中胰腺炎组及治疗组均分为3小组，取 集大鼠胰腺组织，部分胰腺组织置于 10％甲醛溶液固 3、6、12h3个时间点各8只进行相应实验操作。 定行 HE染色观察病理学改变。采集大 鼠各时间点胰 1．2 仪器 Bio—RadPowerPac200型电泳仪、Multi— 腺组织，使用Westernblot法检测组织中JNK通路下游 skenMK3酶标仪、Trans—BlotSD半干转印槽、摩尔超 的直接作用底物磷酸化 e—jun蛋白水平 ，并测定组织 纯净水机 、Odyssey红外激光成像系统由美国相关公司 中细胞氧化损伤的重要检测指标 MDA的含量。对照 生产 ；TOMY 自动高压灭菌锅由 日本TOMY公司生产， 组大鼠在腹腔注射生理盐水后 24h与胰腺炎组大鼠