改良萃取法制备脱细胞神经支架的去髓鞘效果评价.pdfVIP

第 33卷 第3期 中山大学学报 (医学科学版) Vo1．33 No．3 2012年 5月 JOURNALOFSUNYAT—SENUNIVERSITY(MEDICALSCIENCES) Mav． 2012 改良萃取法制备脱细胞神经支架的去髓鞘效果评价 侯 博，李文胜，秦 峰，王 辉 ，何海勇，龚 谨，叶卓鹏，张保豫，郭 英 (中山大学附属第三医院神经外科，广东广州 510630) 摘 要：【目的】评价改 良化学方法制备脱细胞神经支架的去髓鞘与脱细胞效果。 【方法】12只成年 sD大 鼠(230— 280g)，取双侧坐骨神经，随机分为3组，每组 8例，分别采用不同的处理方法。正常对照组 ：不作任何处理 ；Hudson组 ：采用 TritonX一200、磺基三甲铵乙内酯一10(sB一10)、磺基三甲铵乙内酯一l6(sB一16)处理；改良组 ：采用 TritonX一200、SB一10、SB一16 联合脱氧胆酸钠(SDC)及过氧乙酸(PAA)处理。处理后行 HE染色 、甲苯胺蓝染色及透射电镜检查，观察脱细胞 、去髓鞘程度 及基底膜保存情况。 【结果】形态学检查显示，与对照组相比，Hudson组中的细胞核结构完全消失，甲苯胺蓝染色为散在同心 圆状的髓鞘结构，透射电镜下显示髓鞘板层成分保留，但有崩解断裂 ，轴突依然存在；改良组细胞核完全去除，与Hudson组不 同的是，甲苯胺蓝染色显示为不规则多孔状结构 ，髓鞘成分消失，透射电镜下显示髓鞘及轴突成分彻底去除，基底膜管壁结构 清晰并完整保留。 【结论】改良萃取法制备脱细胞神经支架能够有效地去除细胞和髓鞘成分，同时基底膜管结构保留完整。 关键词：萃取法；神经；脱细胞支架 ；髓鞘 ；基底膜管 中图分类号：R318．08 文献标志码 ：A 文章编号：1672—3554(2012)03—0322—04 DemyelinationEffi ciencyofOptimizedExtractiveM ethodinPreparationof AcellularNerveScaff0ld HOUBo，LIWen—sheng，QINFeng，WANGHui，HEHal-yong，GONGJin， YEZhuo—peng，ZHANG Bao—yu，GUOYing (DepartmentofNeurosurgery，TheThirdAffiliatedHospital，SunYat—senUniversity，Guangzhou，China510630，China) Abstract：O【bjective】 Toevaluatethecompetenceofmodifiedextractivemethodinremovingmyelinsheath，therebyseeka kindofeffectiveextractivemethodtoprepareacellularnervescaffold．M【ethods】TwelveadultSDratsweighing230—280gwereused． Thebilateralsciaticnerveswereharvestedanddividedevenlyintothreegroupsaccordingtopreparationmethods： controlgroupwere rfeshnerve；HudsongroupweretreatedbyTritonX一200；sulfobetaine·10(SB一10)，sulfobetaine一16(SB一16)andmodifiedgroup wereprocessedbyTritonX一200，SB一10，SB一16，sodiumdeoxycholate(SDC)andperoxyaceticacid(PAA)．HE，toluidineblue， andtransmissionelectronmicroscope (TEM) wereusedtomonitortheefficiencyofextractivemeth