头孢噻吩钠残留量检测方法的验证报.docVIP

法学验证报告:头孢噻吩钠残留量检测方法的验证报 (2008-09-19 19:45:13) 转载 标签： 工作经验 分类： 工作感想及心得(推荐浏览） ? ? 名???? 称： ? 头孢噻吩钠残留量检测方法的验证报告 ? 文件编号：SOP YZ5003-R081 ? 起草人/日期?????????????????? /日期?????????????????? /日期?????????????????? ? ???????????????????????? ? 1仪器与试药 高效液相泵：日本岛津LC-10Avp，检测器：SPD-10Avp，色谱柱：安捷伦C18 (5μ，300nm×3.9mm)，积分仪：N2000色谱工作站。 头孢噻吩对照品：含量为92.0%，批号：130407-200306(中检所)，头孢噻吩钠样品：桂林xxx药业有限公司生产；乙腈为色谱纯，冰醋酸为分析纯，水为超纯水。 2 色谱条件?? 色谱柱：Watersμ-Bondapak C18 (5μ，300nm×3.9mm)， 流动相：乙腈—水—冰醋酸=25:75:1 检测波长：254nm。 流? 速：1ml/min 柱? 温：30℃ 进样量：20μl 3。数据及图像处理应用软件: excel数据处理软件，origin数据处理软件。 ? 4.实验方法与结果 4.1线性关系考察 ???? 精密称取头孢噻吩对照品50 mg，置50ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀；精密吸取上述溶液0.25ml、0.50ml、0.75ml、1.00ml、1.25ml 、1.50ml置１０ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀；分别取上述溶液各20μl，进样，记录峰面积A，以峰面积值为纵坐标（Y），头孢噻吩钠的浓度（C）为横坐标（X），分别进行线性回归，得头孢噻吩钠回归方程为A=4.79224×106C+11119.8，相关系数r=0.99985；头孢噻吩钠在0.026～0.16mg/mL范围内呈良好的线性关系。（见图1） 图1 ? 4.3 精密度试验 ??? 取上述对照品溶液（1.0→10）进样，每次20μl，共5次， 头孢噻吩钠的RSD为： 0.36%。结果见表1 表1 ? 1 2 3 4 5 RSD% 峰面积 5094198 5077109 5083874 5056710 5093422 0.31 ? 4.4 稳定性试验 ??? 取上述对照品溶液（1.0→10），分别于0、2、4、6、8小时进样，头孢噻吩钠的峰面积内基本不变，RSD分别为：。结果见表2 表2 时间(小时) 0 2 4 6 8 RSD% 峰面积 5168701 5169800 5158566 5168802 5162589 0.09 ? 4.5 最低检测量和检测浓度 ?? ?取上述对照品溶液（1.0→10）溶液，，经过反复稀释，进样，根据最低检测限为信噪比的3倍原则，最终确定头孢噻吩钠最低检测量和最低检测浓度为：0.02μg和 0.0001mg/mL结果见表3；图谱见图2、图3。 ????????????? ???????????? ??? 表3 ? 最低检测量（μg） 最低检测浓度（mg/mL） 头孢噻吩钠 0.02 0.0001 ? 4.6回收率试验 4.6.1试验方法 准备六块搪玻璃材质的20mm×10mm的板材。每块搪玻璃板均进行以下操作： ??配制浓度为0.1mg/ml头孢吩钠溶液，定量装入喷雾器。 ??将50ml溶液尽量均匀的喷在搪玻璃板材的下半部区域内（将板材平均两等分，药液喷于下面的10×10mm区域内）。 ?水平放置板材，使药液自然干燥。 ?将搪玻璃板垂直放入装有注射用水清洗液的500ml烧杯中（搪玻璃板贴于烧杯杯壁，清洗液液面高度约为100~120mm），使用玻璃棒对清洗液进行搅拌，搅拌时间为5分钟。 ?搅拌完成后，取10ml清洗液作为样品，用HPLC法进行检测。检测过程中，对照品配制浓度分别为 （50×0.1×50%）÷（X/10） （50×0.1×60%）÷（X/10） （50×0.1×70%）÷（X/10） （50×0.1×80%）÷（X/10） 其中：? ?????????????????? 50为喷洒头孢噻吩钠溶液于搪玻璃板材上的数量，ml ?0.1为喷洒头孢噻吩钠溶液于搪玻璃板材上的浓度，mg/ml ?50%/60%/70%/80%为假设回收率的值 ?X为装入烧杯中注射用水的数量，ml ? 完成检验后，按照下列公式进行回收率的计算： ? 其中：C清洗液为清洗液中头孢噻吩钠浓度检测结果，mg/ml X为装入烧杯中少于射用水的数量，ml 50为喷洒头孢噻吩钠液于搪玻璃板材上的数量，ml 0.1为喷洒头孢噻吩钠溶液于搪玻璃板材上的浓度，mg/ml ??对每块板取样回收