SOD1转基因小鼠解偶联蛋白-3及氧化应激的研究.pdfVIP

目 录 中文摘要……………………………………………………………………1 英文摘要……………………………………………………………………4 研究论文SODl转基因小鼠解偶联蛋白一3与氧化应激的研究 前言…………………·········……………………………………······9日【I舌”““““”””“”一””一”””““”””一”“一””一”一“…””””一。9 材料与方法……………………………………………………………10 结果····…·····…············…············…············…··················21 附图···…···……····…··············…························……·········23 附表…………………······……………………………………………26 讨论··················…······························…···········…··········29 结论·····…····················································…···············32 参考文献………………………………………………………………33 综述 肌萎缩侧索硬化骨骼肌功能障碍的研究进展…………………37 致谢·····················…············…············…···············…·········46 个人简历…………………………………………………………………47 中文摘要 SODl转基因小鼠解偶联蛋白一3与氧化应激的研究 摘 要 lateral 目的：肌萎缩侧索硬化(蛳仃ophic 性神经变性疾病，侵犯人体的运动系统，表现为肌肉萎缩和无力，并最终 进展至呼吸肌，危及生命，一般发病后3—5年死亡。运动神经元的退行性 变已被证明可由一些机制解释，包括氧化应激，谷氨酸兴奋毒性和凋亡等。 这表明ALS是一种多因子起源的疾病。然而，选择性运动神经元丢失的确 切机制依然不清，目前仍无特效治疗。 ALS发病过程中，疾病早期即出现骨骼肌线粒体形态异常、功能障碍 以及能量代谢异常等病理变化，线粒体功能异常可导致一系列相互作用的 损伤过程，氧化应激、线粒体能量代谢障碍、细胞内钙超载、兴奋性氨基 酸释放过量，这些均能导致ALS的发生或恶化。这一发病机制正日益受到 人们的关注。 机体内活性氧(reactiveoxygen 衡障碍，导致ROS在体内的大量蓄积，产生氧化应激。氧化应激所致的线 粒体损伤在运动神经元变性过程中起到了重要作用。解偶联蛋白 的抗氧化功能已越来越引起人们的重视。在ALS的发病中，氧化应激参与 了其中，因此我们推测， UCP3在ALS发病各阶段表达会有所改变。 基水平的变化，深入研究解偶联蛋白3与氧化应激的关系，明确UCP3对于 线粒体功能是否具有保护作用，以抗氧化应激和参与代谢紊乱为切入点， 探讨其在肌萎缩侧索硬化疾病发生和进展中的作用。 方法：选用小鼠共36只，均为雌性。实验分为2组：实验组为国际 中文摘要 保存于一80℃冰箱。利用Westernblot方法，检测各个发病阶段小鼠骨骼 肌解偶联蛋白一3蛋白表达变化。应用RT—PCR检测各个发病阶段小鼠骨骼 肌解偶联蛋白一3mRNA的表达水平变化。留取肌肉组织，进行脂质过氧化 并利用spssl3．O对数据进行分析。 结果： 1 SOD卜G93A转基因小鼠骨骼肌UCP3蛋白的动态表达 (PO．05)；症状期与终末期相比较无统计学意义。 1．2 状期升高，差异有统计学意义(PO．05)，终末期明显升高，差异有统计 学意义(PO．01)。 1．3同窝对照组UCP3蛋白表达水平随年龄增加无变化。 2SOD卜G93A转基因小鼠骨骼肌UCP3mRNA的动态表达 2．1随疾病进展，SOD卜G93A转基因小鼠骨骼肌UCP3mRN