骨髓间充质干细胞的营养效应对一氧化碳致星形胶质细胞损伤的作用.pdfVIP

骨髓间充质干细胞的营养效应对一氧化碳 致星形胶质细胞损伤的影响 硕士生姓名：赵旭生 指导教师：王苏平教授 专业名称：神经病学 摘要 新和多向分化的潜能，在不同的诱导条件下可以分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪 细胞、心肌细胞和神经细胞等多种类型的细胞。在治疗神经组织损伤中具有很大 的潜力。目前有很多研究显示BMSCs移植有助于神经组织损伤的恢复，但是其恢 复功能的确切机制仍然不完全清楚。虽然BMSCs的分化和细胞融合都可能促进神 经功能的恢复，但其较低的存活率不可能完全解释神经损害的恢复水平。当前不 断有证据显示BMSCs能够通过释放营养因子和细胞因子促进神经组织功能的恢 effects)。 复，而BMSCs本身不发生分化，此种功能称为MSCs的营养效应(trophic 本实验排隙卧假满对星形胶质细胞(缀【D(=，，6e—峪)冉勺作用，使用BMSCS的条件培 养液来踞翘强VISCs的鸶粥瓤姗致艇损伤的影响，探讨BMSCs的营养效应及其临床 开发应用。 方法：采用密度梯度离心法结合贴壁特性培养大鼠BMSCs。流式细胞仪检测 时，更换含10％胎牛血清的DMEM培养液，培养24小时后收集上清，保存备用。 无菌条件下进行大鼠脑皮质AS的培养，纯化，免疫细胞化学染色进鉴定。实验分 组：①正常对照组：正常培养液，5％C02培养箱中培养的AS；@co组：正常培 的AS。于倒置相差显微镜下观察一般形态学变化。采用计数板计数法检测各实验 组细胞生长增殖情况。以四甲基偶氦唑盐(MTT)法检测AS存活率。以比色法测 定各实验组细胞培养液中乳酸脱氢酶(1actate 胞仪测定各实验组细胞凋亡率。 结果：1、AS的生尉觏觏As在有CO存在的条件下培养24h后数量明显 少于保护组和正常对照组(pO．05)，低浓度保护组高浓度保护组；AS在停用 浓度保护组高浓度保护组；AS在停用CO的条件下培养24、48h后治疗组数量 存浮轷脯钡崾疹最AS在有CO存在的条件下培养24h后军辩明显小于保护组和正 高浓度保护组；AS在停用CO的条件下培养24h后低浓度治疗组存活率略大于 护组，其中低浓度治疗组高浓度治疗组；AS在停用CO的条件下培养48h后治 疗组存活率仍小于保护组和正常对照组(pO．05)，其中低浓度治疗组高浓度 显多于保护组和正常对照组(pO．05)，低浓度保护组高浓度保护组；AS在停 后治疗组的LDH释拗于CO组，多于保护组，其中培养24h后低浓度治疗组略 大于高浓度治疗组(p0。05)；培养48h后低浓度治疗组明显大于高浓度治疗组 亡率明显大于保护组和正常对照组(p0．05)，低浓度保护组高浓度保护组； AS在停用CO的条件下培养24、48h后细胞凋亡率仍明显大于保护组和正常对照 高浓度治疗组。 条件培养液，通过BMSCs的营养效应能够增加AS的生长速度。CO可降低体外 的营养效应能够增加AS的存活率。CO可使体外培养AS的LDH释放量增加，破 的营养效应可降低LDH释放量，保护细胞膜的完整性。CO可促进体外培养AS 对损伤所致的细胞凋亡具有保护作用。 关键词：骨髓间充质干细胞营养效应星形胶质细胞一氧化碳 2 TheEffectsof EffectsofBone Trophic Marrow StemCellson Induced Astrocytesby CarbonMonoxideinCulture Master candidate：Zhao degree Xusheng Supervisor：Professor Wan