缺血预处理对大鼠早期脑干缺血再灌注后再灌注时间窗的影响以及BAX、GSH-PX表达变化的探究.pdfVIP

目 录 全脑缺血预处理对早期脑干缺血再灌注后再灌注时间窗的影响 1 及BAX 、GSH-PX 表达变化的研究„„„„„1 1.1 中文摘要„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„1 1.2 英文摘要„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„3 1.3 前言„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„5 1.4 材料与方法„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„7 1.5 结果„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„12 1.6 讨论„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„24 1.7 结论„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„30 1.8 参考文献„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„31 1.9 英汉缩略词对照表„„„„„„„„„„„„„„„„„35 2 致谢„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„36 3 （综述） „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„39 缺血预处理对大鼠早期脑干缺血再灌注后再灌注时间窗的影响以及 BAX、GSH-PX 表达变化的研究 摘 要 目的：通过研究缺血预处理对大鼠早期脑干缺血再灌注后再灌注时间 窗的影响及BAX、GSH-PX 表达变化，从而揭示缺血预处理对脑干的神 经保护可能机制，进一步为脑干缺血耐受增强提供依据，并在临床上 为后循环溶栓时间窗的选择提供参考依据。方法：1 雄性SD 大鼠144 只,体重300——320g,随机分为假手术组、缺血组、缺血再灌注组、 缺血预处理组（缺血组分为缺血 1h、2h、3h、4h、5h，缺血再灌注 组分为缺血1h 再灌注7h,2h 再灌注6h，3h 再灌注5h，4h 再灌注4h， 缺血5h 再灌注3h 五个观察时间点，每组个观察点8 只大鼠，缺血预 处理组先给予全脑缺血预处理 3 分钟，72 小时后再给予脑干缺血再 灌注，各时间点同缺血再灌注组） 2 缺血预处理组采用改良的 pulsinelli 四血管阻断方法给予缺血预处理组大鼠全脑缺血预处理 3 分钟，间隔三天后制备脑干缺血再灌注模型，缺血再灌注组应用微 型动脉夹夹闭基底动脉后间隔不同时间点打开动脉夹使血管再通，缺 血组只夹闭基底动脉相应时间，各组造模成功并纳入实验后在相应时 间点处死取材。3 采用HE 染色应用光镜观察细胞结构变化4 采用TTC 染色及脑干BAEP 观察脑干缺血范围及程度 5 采用免疫组化观察BAX 变化6 采用酶联免疫吸附(ELISA)法观察GSH-PX 的变化。结果：（1）HE 染色可见假手术组神经细胞形态结构正常；缺血组随着缺血时间延长 逐渐出现细胞水肿、炎性反应、细胞核固缩等逐渐加重表现。缺血再 灌注组及缺血预处理组有类似的表现，同缺血组比较，在I R 及之前， 3 5 缺血组细胞损伤重于缺血再灌注组，之后相反，缺血预处理组时间点 则推迟在I R 缺血预处理各时间点损伤轻于缺血再灌注组。（2）TTC 4 4。 染色显示假手术组各时间点均未见缺血表现，其余三组 1h 及在 I R 1 7 均未见明显缺血表现；缺血再灌注组缺血情况小于缺血组，之后相反； 在I R 、I R 、I R 缺血预处理组小于于缺血组，之后相反。（3）BAEP 2 6 3 5 4 4 变化：缺血再灌注组在 I R 、I R 、I R 与缺血组 1h、2h、3h 时间点 1 7 2 6 3 5 潜伏期 （PL）相比较，缺血组大于缺血再灌注组 （P0.05)，此后各 时间点相反；缺血预处理组在I R 、I R 、I R 、I R 与缺血组1h、2h、 1 7 2 6 3 5 4 4 3h、4h 时间点潜伏期（PL）相比较，缺血组大于缺血预处理组（P0.05). 此后各时间点相反。 缺血组Ⅰ-Ⅲ、Ⅲ-Ⅴ、Ⅰ-Ⅴ波峰间期