香烟暴露对大鼠肺组织及人血管内皮细胞MMP-9、TIMP-1表达的影响.pdfVIP

缩略语表 原创性声明 本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究 工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢 的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不 包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我 共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在在论文中作了明确的说 明。 作者签名： 关生 关于学位论文使用授权说明 本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校 有权保留学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位 论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论 文；学校可根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文。 作者签名：二坠导师签名阵日期：—二z—-年￡月二妇 硕士学位论文 第一章前言 第一章前言 obstructive 慢性阻塞性肺疾病(chronic pulmonarydisease，COPD)是一种具有 气流受限特征的可以预防和治疗的疾病，气流受限不完全可逆、呈进行性发展， 与肺部对香烟烟雾等有害气体或有害颗粒的异常炎症反应有关，肺气肿是其重要 的病理改变，肺功能检查对确定气流受限有重要意义。慢性阻塞性肺疾病由于其 患病人数多，死亡率高，社会经济负担重，已成为一个重要的公共卫生问题，在 我国，COPD患病率占40岁以上人群的8．2％Ill。欧美国家的患病率约为 升【3】，世界银行，世界卫生组织公布，至2020年COPD将居世界疾病经济负担的 第5位。 然而，COPD的发病机制尚未完全明了，目前主要有3种学说：1、气道和 肺实质的慢性炎症。2、蛋白酶／抗蛋白酶系统失衡学说。3、氧化，抗氧化系统失 衡学说。吸烟或者有害气体可以引起肺部的炎症反应，大量炎症细胞如巨噬细胞、 中性粒细胞、淋巴细胞等在肺内聚集，被认为是引起COPD肺组织结构改变的 关键【4～。肺部的炎症还可以导致气流受限嘲和过度充气[71，继而引起用力时呼 吸困难和更加频繁的急性发作嗍。 正常的肺功能需要有细胞外基质(ECM)支持的肺泡结构，异常的ECM降 解和沉积是导致气道壁结构异常构建、肺实质破坏、基底膜增厚及间质增生的重 要原因。COPD患者的气道重建，与体内蛋白酶，抗蛋白酶系统失衡密切相关唧。 参与COPD发病过程的蛋白酶有中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)、组织蛋白酶、基质 金属蛋白酶(MMPs)等。NE是一种中性粒细胞丝氨酸蛋白水解酶，可消化连接组 织和蛋白聚糖，从而造成肺气肿的形成。组织蛋白酶是另一种中性粒细胞丝氨酸 蛋白酶，参与了肺组织的降解过程。1V[^／[Ps由26种结构和功能相似的蛋白水解酶 所组成，它们主要由中性粒细胞、肺泡巨噬细胞和气道上皮细胞产生，能够降解 肺实质细胞外基质的所有成份，包括弹性蛋白、胶原蛋白、蛋白多糖、层粘联蛋 白和纤维连接蛋白。Lang等tlo】研究发现，中性粒细胞弹性蛋白酶不能分解人类 I型胶原，该型胶原占肺细胞外基质①CM)50％和％，而主要来源于巨噬细胞的 基质金属蛋白酶(M佃s)几乎能降解所有的EcM成分。一些动物研究【11J2】也认为， 硕士学位论文 第一章前言 相较于NE，主要来源于巨噬细胞的MMPs在COPD发病中起更重要的作用。 既往关于COPD的研究多将重心放在炎症细胞和肺泡上皮，而在上个世纪 内皮细胞，出现肺泡间隔细胞的凋亡增加，肺泡腔扩大，同时伴无炎症细胞增加 的舢s增高。这些研究均提示，血管内皮细胞可能在COPD的发生中起重要 作用，在一定的刺激下可能还伴有蛋白酶的分泌异常。 本实验通过烟雾暴露的方法建立COPD的模型，观察大鼠肺组织MMP．9及 的表达情况。 2 硕士学位论文 第二章材料、对象与方法 第二章材料、对象与方法 2．1材料与主要仪器 羊抗大鼠MMP-9抗体