酸性鞘磷脂酶对急性肺损伤的调节作用分析.docVIP

　　酸性鞘磷脂酶对急性肺损伤的调节作用分析 　　酸性鞘磷脂酶( acid sphingomyelinase，ASM) 是鞘脂类物质代谢的关键酶，能够催化鞘磷脂产生神经酰胺。鞘磷脂是细胞膜和脂蛋白中一种重要的脂质成分，其体内平衡能够维持细胞的正常结构和功能。鞘磷脂是由神经酰胺和磷酰胆碱在鞘磷脂合成酶的作用下生成，也能够在几种鞘磷脂酶的催化作用下水解为神经酰胺和磷酰胆碱。 　　神经酰胺通常可以通过以下方式生成: ( 1) 通过鞘磷脂酶活性对鞘磷脂进行水解; ( 2) 通过抑制神经酰胺酶，这种酶可以水解神经酰胺产生鞘氨醇和脂肪酸; ( 3) 通过激活从头合成路径。 　　鞘脂类神经酰胺是一种重要的第二信号分子，可以调节多种信号通路。神经酰胺及其代谢物影响多种细胞过程，包括凋亡、衰 老、分 化、迁移等。鞘磷脂酶可根据它们的最适 pH 值分为酸性、中性和碱性鞘磷脂酶。ASM 是酶家族中重要一员。 　　目前，这种酶被发现存在于几乎所有的细胞类型和人类组织中。中性鞘磷脂酶( NSM) 存在多种亚型，这些亚型由 3 种不同的基因( NSM 1、NSM 2、NSM 3) 来编码，并且需要 Mg2 +和 Mn2 +来保持活性。ASM 与 NSM 1、NSM 2 被认为是应激性细胞凋亡的关键调节者。碱性鞘磷脂酶在肠道里分泌，并且以一种特殊的胆汁盐依赖的方式吸收食物中的鞘磷脂。碱性鞘磷脂酶在结肠里可以调节神经酰胺的形成，具有抗增殖和抗炎的功能。 　　1 酸性鞘磷脂酶的分子生物学特性 　　ASM 执行其代谢功能之前需要进行多个水平的细胞调节，需要一系列的转录、翻译、转录后修饰、以及适当的运输才能形成成熟且具有功能性的酶。ASM 的活性受多种因素的影响，包括脂质、阳离子、pH、氧化还原反应、和其他蛋白的影响。 　　尼曼-匹克病( Niemaoh-Pick disease) 是由德国儿科医生 Albert Niemann 在 1914 年首次提出，随后研究发现尼曼-匹克病患者体内鞘磷脂堆积，之后又有研究指出尼曼-匹克病是由 ASM 缺陷引起的，这些研究成果促使人们对 ASM 及其编码基因进行更广泛深入的研究。 　　1． 1 编码基因 　　编码 ASM 的基因是 SMPD1。SMPD1 基因位于11 号染色体短臂( 11p15． 1 ～ 11p15． 4) 上，其 cDNA全长约 2． 5 kb，包括 1890 bp 的开放阅读框，能够编码 629 个氨基酸。鼠和人的 SMPD1 基因在 cD-NA 和蛋白水平上具有 82% 的序列一致性，这表明SMPD1 基因在哺乳类动物中是高度保守的。有趣的是，秀丽线虫有两种独立的基因，它们能够编码功能性的 ASM( ASM-1 和 ASM-2) ，这两种基因表现出截然不同的时间表达特征，这与它们独特的生长发育阶段相一致。人类 SMPD1 基因能够编码两种 ASM，分别为溶酶体型 ASM( L-ASM) 和分泌型ASM( S-ASM)。 　　1． 2 转录后修饰和细胞内转运 　　最初翻译的 ASM 蛋白含有一个信号肽和 4 个功能结构域( 鞘脂类激活蛋白/SAP 结构域、富含脯氨酸的结构域、金属磷酸酯酶结构域和 C-端结构域) 。转录后，ASM 在内质X中经历蛋白水解过程。在内质X中，ASM 前体的 N-端信号序列被信号肽酶水解，形成一种成熟的形式。 　　1． 3 N-糖基化 　　有研究人员预测在 ASM 多肽链中有 6 个 N-糖基化位点，其中有 5 个是具有功能性的( Asn86、Asn175、Asn335、Asn395、Asn520)。ASM 的糖基化能够使其适当的折叠和转运，同时在溶酶体处于有害环境时其糖基化能够阻止对 ASM 的破坏，起到保护作用。这些低聚糖侧链含有甘露糖-6-磷酸残基( M6P) ，能被 M6P 受体识别，或者与分拣蛋白( 分拣蛋白是一种 I 型跨膜受体糖蛋白，含有与 M6P受体相似的结构) 相互作用，进而将 ASM 转运至溶酶体。同时，ASM 在高尔基体中的碳水化合物处理过程能够产生不含 M6P 残基的 ASM，此时的 ASM会进入分泌途径。 　　1． 4 磷酸化 　　Hannun 等研究发现，PKC 可选择性地促使ASM 上丝氨酸残基 508 的磷酸化，导致 ASM 的活化并向质膜上转移。脂多糖能够导致 ASM 的活化、神经酰胺的积累和磷酸化以及 PKC 的活化，进而激活 Toll 样受体 4( TLR4)。这些结果表明磷酸化作为 ASM 活化的生物化学机制有助于理解ASM 在正常发育和疾病状态下的功能。但是其磷酸化机制仍需进一步的研究。 　　1． 5 阳离子需求 　　ASM 在组织提取物中首次作为一种酶被识别，它能够水解鞘磷脂产生神经酰胺和脂肪酸，最适 pH值为: 4． 5 ～ 5． 0。