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200 ( 自然科 版) 200
1 Journal of Qinghai Normal University( Natural Science) No. 1
1 1 1 1 2
王弋博 , 李博, 李三相, 张海林 , 金文晶
( 1. , 741000; 2. , 741000)
: ,
, , ,
[ 1, 2]
, ( Bacillus Licheniformis) ,
2- 18 , 16 , 18
2e 540nm OD
, , , 48, , 48
: ; ; ; ;
: Q9 9. 11 :A : 1001- 7542( 200 ) 01- 0082- 04
,
, ( amylopectin) 75%- 85% ,A- 1, 6 20-
25 , 4% - 5% A- 1,6
[ 1]
, A- 1, 6 ,
[ ,4]
, ,
, ,
, , , , B
- ,
,
[5]
, ,
, , , ,
,
1
1. 1 ( amylopectin) , ( pullulan) ,
sigma ,
1. 2
1. 2. 1 分离培养基(W/ %)
015, Na HPO 0101, KH PO 01015, MgSO #7H O 0105,NaCl 011, 012, 116, pH710
2 4 2 4 4 2
- 712, 8 0c
1. 2. 2 斜面培养基(W/ %)
1, 016, 011,MgSO4 #7H2O 0105,K2HPO4 011, pH710- 712, 15 20c
1. 2. 摇瓶发酵培养基( W/ %)
112, 018, 012,MgSO4#7H2O 0105, K2HPO4 011, pH710- 712, 15 20
1. 2. 4 菌种鉴定用培养基[ 6]
: 2002- 05- 21
: ( 197 - ) , ( ) , , ,
1 , , , : 8
1. 721 ( ) , (PHS- 29A )
1. 4
1. 4. 1 发酵方法
4mL , 2 e 180r/ min 16hr, 25mL
250mL , 2 e 180r/ min 48hr,
1. 4. 2 菌种的筛选及分离纯化
, , 2 e ,
, , ,
180r/min 48hr ( 4mL) ,
1. 4. 菌种鉴定
[ 10]
V- P ;
[ 6]
1. 4. 4 酶活的测定方法( 以葡萄糖作标准曲线) [ 10]
000r/ min 0 012mL, 015mL%01 mLpH618
( 011moL/L) , 45 e 0min, 1mL 015mL DNS , 5min ,
[ 11]
, 25mL, 540nm , : ,
1LmoL 1
1. 4. 5 菌种生物量菌种产酶与时间的关系
, 2hr, 50 , 450nm OD
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