酸竹属遗传多样性研究.pdfVIP

酸竹属遗传多样性的ISSR分析 摘要 chienouensis)、福建酸竹(Acidosasalongi坛ula)、黄甜竹(Acidosasa 8个 venusta)和火节属(Indosasa)的橄榄竹(1ndosasagigantea)进行ISSR多态性分析，筛选了1 随机引物，均可扩增出清晰、重复性好、多态性明显的条带。在DPSv7．05版软件中，统计18个引 methedwitharithmetic 物的扩增产物来计算Neili遗传距离，建立UPGMA(unweightedpairgroup mean)类平均法聚类分析图。试验得到如下结论： 提取试剂盒，对提取方法进行优化，提取样品DNA，从而获得高质量的基因组DNA。 (2)采用单因素实验设计方法，对影u向jPCR反应的各个成分和扩增程序进行了优化，建立了酸 0．2pM弓l物、1．OUTaq酶、50ng模板DNA、加火菌的ddH20定容至20扯L。 (3)从100条引物中，筛选出18条能够扩增出产物稳定、特异性强、扩增谱带清晰的ISSR引 物。利用筛选出的这18个引物和已优化的ISSR反应程序和反应体系，对来自福建农林大学百竹园 的酸竹属4个竹种和大节属的橄榄竹进行全面的ISSR分析，结果在全部供试资源中共扩增出117 位点，其l|I多态性位点共计97个，占77．7％。 之间，平均为0．5213。表明各种问有很大的差异，遗传背景比较复杂。 (5)用18个随机引物对5个供试样品进行DNA随机扩增，所得的ISSR扩增产物具有丰富的 多态性，表明酸竹属种间和种内有非常复杂遗传背景，通过ISSR技术可以准确、灵敏、高效地检测 出各个酸竹属种问和种内的遗传多样性。利用UPGMA构建了5份样品的聚类树状图，以遗传距离 0．66为标准，将5份供试样品可分为3大类群：第l类包括粉酸竹、福建酸竹、黄甜竹；第2类为 橄榄竹：第3类为黎竹。 (6)橄榄竹的分类归属l’uJ题在传统分类上存在一定争议，分歧之处在于《中国植物志》(第九 卷第一分册)将橄榄竹归为大节竹属，而《福建植物志》把它归为酸竹属。通过分子标记的遗传距 离分析得出，粉酸竹和福建酸竹之间遗传距离最近，黄甜竹次之，橄榄竹其次、黎竹最远，本研究 结果支持将橄榄竹归为酸竹属。冈此，依据现代的分类手段可以有效地解决传统分类中有争议的问 题，是传统分类中一种可靠的辅助手段，对区分一些归属不清或混淆的竹种具有重要作用。 关键词：酸竹属；ISSR分子标记；亲缘关系；遗传多样性 主题词：酸竹属；分子标记；遗传多样性 StudiesonGenetic ofAcidosasa Diversity This uses ofDNA(ISSR)between study repeatedsequences inter-simple amplification technology， the areasfollows：Acidosasa analysespecies chienouensis，Acidosasa edulis longiligula，Acidosasa (wen)，Acidosasavenusla，lndosasaof 8 lndosasa，1random wereselectedwhich gigantea primers distinct andunmistakable