RP-HPLC法同时测定芫花中芹菜素、羟基芫花素、芫花素的含量.pdf

raditionalChineseMedicine,June,2010．Vo1．29,No．6 医药 2010年 6月 第29卷 第 6期 Beiiin~JoumalofT— — RP—HPLC法同时测定芫花中芹菜素、 羟基芫花素、芫花素的含量 宋丽丽 王丽峰 郭茂娟 【摘要】 目的 对芫花中芹菜素 (I)、3-羟基芜花素(Ⅱ)和芫花素 (Ⅲ)3种黄酮苷元进行含量测定。方法 采用反相高效 液相色谱法，使用大连依利特HypersilC18柱(250mmx4．6mm，5 m)；流动相为甲醇-0．1％醋酸水溶液 (60：40)，流速 1．0mLm·in～， 检测波长 340n／n，柱温 25℃。结果 化合物 I～Ⅲ的线性范围 (n=6)依次为 0．1-5．0xIg(r=O．9999)，0．1~1．0xIg(r=0．9999)，0．1— 5．0xIg(r=O．9999)。化合物 I～Ⅲ平均 回收率 (n=6)分别为 99．6％、102．8％，100．2％；RSD分别为 1．8％、1．5％，1．1％。结论 本方 法可准确地 同时测定芫花 中3个黄酮苷元的含量，方法精密度高、简便、快速。 【关键词】芫花；芹菜素；羟基芜花素；芫花素；反相高效液相色谱法；含量测定 芫花 (DaphnegenkwaSieb．etZucc．)为瑞香科植 (Dpahne genkwaSieb．etZucc．)。 物芫花 的干燥花蕾，主要产于安徽 、江苏、浙江 、山 化合物 I～Ⅲ对照品为 自制 。从芫花提取物中分 东、福建、四川、湖北等地(”。芫花的化学成分主要由 离得到，并经 H—NMR．13C—NMR、MS、IR和UV等光 芫花素、羟基芫花素、芹菜素、芫花酯甲、芫花酯乙等 谱鉴定 ，并与文献对比确认其结构6[-01，按本方法色谱条 组成2【]。芫花具有泻水逐饮 、解毒杀虫的功效 ，用于治 件 ，归一化测得纯度分别为98．9％、98．5％、99．3％。 疗水肿胀满、胸腹积水、痰饮喘咳、二便不利，外治疥 2 色谱条件 癣秃疮、冻疮。国内学者 曾报导，用高效液相色谱法 大连依利特HypersilC18柱(250mnix4．6mm，5 测定芫花 中芫花素和芫花酯 甲的含量p卅，以及芜花 m)；流动相为甲醇一0．1％醋酸水溶液 (60：40)，流速 叶中芫花叶苷、木犀草苷、异槲皮苷的含量阁。但至今 1．0mLm·in-1,检测波长 340nm，柱温 25℃。进样量 为止 ．未见用高效液相色谱法 同时测定芫花中多种 10 L。在此条件下化合物 I～Ⅲ与其他组分均能达 黄酮苷元成分含量的文献报道 。我们从芫花中分离 到基线分离。见图 1。 得到了7个黄酮类单体化合物，分别为芹菜素 (I)、 3一羟基芫花素(Ⅱ)、芫花素 (Ⅲ)、山奈酚一3—0一B—D一 (6”一P一香豆酰)吡喃葡萄糖甙(IV)、山奈酚一3一O—B—D 葡萄糖甙 (V)、木犀草素一7一甲氧基一3-O—B—D一葡 ∞ ：m 40 ^ 萄糖甙(Ⅵ)、芫花素…50 B—D一葡萄糖甙(Ⅶ)，其 中 I～Ⅲ在芜花中含量较高 。本文采用反相高效液相色 谱 (RP—HPLC)法测定 了芫花 中化合物 I～Ⅲ3种黄 酮类化合物的含量，此研究结果为芫花质量标准的 建立提供了科学依据 。 1仪器与试药 炎 岛津 LC一2010A高效液相色谱仪 ．岛津 LC一 2010A工作站。甲醇为色谱纯，水为重蒸馏水，其它 试剂均为分析纯 。 图1化合物 I～Ⅲ的对照品(A)及样品(B)色谱图 本实验所用芫花购 自天津市安舜大药房 ．经天 津 中医药