重组毕赤酵母高密度发酵生产内切型纤维素酶的条件优化.pdfVIP

第 8卷第 4期 生 物 加 工 过 程 Vo1．8No．4 2010年 7月 ChineseJournalofBioproeessEngineering July20l0 doi：10．3969／j．issn．1672—3678．2010．04．010 重组毕赤酵母高密度发酵生产 内切型纤维素酶的条件优化 黄文娟，刘 睿 ，张 达 ，丁少军 (南京林业大学 化学工程学院，南京 210037) 摘 要：为优化 内切型纤维素酶高密度发酵工艺条件，在 7．5L发酵罐 高密度发酵条件下，研究内切型纤维素酶表 达量以及毕赤酵母胞外蛋白酶合成水平的影响因素。研 究表明：经340mL甘油补料发酵后，在甲醇诱导阶段 ，pH 为 5．O，温度为 25℃，利用甲醇检测流加控制器控制 甲醇体积分数为 0．33％ ～0．35％时，EGI表达量可达 421．1 IU／mL，比采用固定甲醇流加速率的发酵方法提高了1．49倍 。 关键词：内切纤维素酶；发酵；高密度；优化；巴斯德毕赤酵母 中图分类号：TQ925；Q786 文献标志码 ：A 文章编号 ：1672—3678(2010)04—0051—06 Optim izationofcultureconditionsforimprovingtheproductionof end0glucanaseinhighcelldensityfermentationofPichiapastoris HUANGWen—juan，LIURui，ZHANGDa，DINGShao-jun (CollegeofChemicalEngineering，NanjingForestryUniversity，Nanjing210037，China) Abstract：Theeffectofcuhureparametersontheexpressionofendoglucanaseandtheformationofendog— enousproteasebyhighcell—densityfermentationin7．5Lfermenterwereoptimized．Theresultsshow that after340 mL glycerolfed—batch fermentation，during the process ofmethanolinduction，pH 5．0， temperature25cCI．maintainingtheresidualmethanolconcentration constantly atrange of0．33％ to 0．35％ withamethanolsensor，yieldofEG1was421．1IU／mL，whichwas1．49一foldshigherinproduc— tioncomparedtothatwithconstantmethanolfeedingrate． Keywords：endoglucanase；femr entaion；highcell—density；optimization；Pichiapastoris 内切型纤维素酶 (endoglucanase)是纤维素酶系 隆出一种新的中性 内切型纤维素酶 (endoglucanase 中的重要组分，在纤维素酶水解 中起着重要作用， I，EGI)的基 因(egI)(GenBankNo．AF329732)，和 它和纤维二糖水解酶(cellobiohydrolase)，一葡萄糖 一 般的真菌纤维素酶不同，该酶在 中性pH环境 中 苷酶(3／—1，4一Glucosidase)协 同作用，可将纤维素转 具有较高活性和较强的热稳定性 ，将有望成为理 化成葡萄糖。因此 内切型纤维素酶在木质纤维生 想 的纺织及造纸工业用纤维素酶 。