重组里氏木霉膨胀素的生物学特性研究.pdfVIP

VbI_5No_3 Mar．201O 中国科技论文在线 SciencepaperOnline 第5卷第3期 2010年 3月 重组里氏木霉膨胀素的生物学特性研究 王美花 ，蔡 谨2，黄 磊2，吕正兵 ，张耀洲 ，徐志南2 (1．浙江理工大学生物化学研 究所，杭 1310018； 2．浙江大学化学工程与生物工程系生物工程研究所，杭州 310027) 摘 要：微生物膨胀素在生物炼制行业具有重大潜在应用前途。开展了从重组里氏木霉膨胀素生物学特性测定的工作。 研究了发酵液中膨胀素的生物活性，初步的生物活性测定显示，该蛋白单独使用不具水解纤维素活性．但在纤维素酶 水解纤维素时表现出明显的协同活性。结果表明，温度和pH等因素对分离得到的swollenin蛋白活性影响较大，并确定 了最适的pH和温度范围。 关键词：膨胀素；里氏木霉；米曲霉；纯化；协同活性 中图分类号：0627 文献标志码：A 文章编号：1673—7180(2010)03—0236—4 BioactivityoftherecombinantTrichodermareeseiswolleninproteinfrom thefermentationbroth WangM eihua2 CaiJin HuangLei，LuZhengbin ，ZhangYaozhou ，XuZhinan ， (1．InstituteofBiochemistry，ZhejiangSci—TechUniversity，Hangzhou310018，China；2．InstituteofBiological Engineering，DepartmentofChemicalandBiologicalEngineering，ZhejiangUniversity，Hangzhou310027，China) Abstract：SwolleniniSakindofvery importantprotein forbiomassutilization in thebiorefinery engineernig．The recombniantAspergillusoryzaewasconstructedtoproduceTrichodermareeseiswollenin．Theprelimniarybioactivityassay showedthattheswollenincouldnothydrolyzingcellulosemocrofibrilsbutcouldexhibitasignificantsynergisticeffecton cellulosehydrolysiswith cellulose．Furtherstudiesshowedhtatthebioactivity ofswollenni Was affectedby different temperatureandpH，andtheoptimalrangesofpHandtemperatureweredeterminde foritsfullbioactivity． Keywords：Swollenin；Trichodermareesei；Aspergillusoryzae；purification；synergisticactivity 1992年，Cosgrove实验室的McQueen-Mason等首 维素酶对纤维素的水解程度j【。2002年，Saloheimo等 次从黄瓜幼苗下胚轴伸长区中分离鉴定了一种细胞壁 首次在里氏木霉中发现了一种新的含类似植物expansni 特异眭蛋~expansin蛋 白J。研究结果显示，expnasni 序列的蛋白，这种蛋白也可以破坏纤维素材料的结构， 可以破坏纤维素的微纤维之间或纤维素和其它细胞壁