猪心肌苹果酸脱氢酶的制备及应用 Purification and Application of Malate Dehydrogenase from Swine Heart with High Purity.pdfVIP

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2017-12-17 发布于上海
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猪心肌苹果酸脱氢酶的制备及应用 Purification and Application of Malate Dehydrogenase from Swine Heart with High Purity.pdf

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猪心肌苹果酸脱氢酶的制备及应用 Purification and Application of Malate Dehydrogenase from Swine Heart with High Purity

第27卷第5期食品与生物技术学报 V01．27No．5 2008年9月 ofFood Sep．2008 Scienceand Journal Biotechnology 文章编号：1673—1689(2008)05-0057-05 猪心肌苹果酸脱氢酶的制备及应用 1。2 龚韧孙艳1’2，王静1’2，霍惠芝1’2，杨海麟1’2，王武¨’2 (1．江南大学工业生物技术教育部重点实验室，江苏无锡214122；2．江南大学生物工程学院，江苏无锡214122) 摘要：设计并优化了从猪心中提取高纯度苹果酸脱氢酶的技术路线，采用组织破碎、二度硫酸铵 6 G-75 盐析、DEAESepharose SepharoseF．F．疏水层析及Sephadex F．F．离子交换层析、Phenyl 212．97 Fine凝胶过滤等方法进行分离纯化，苹果酸脱氢酶比酶活达1 U／mg，纯化倍数达122．64 G-75 倍，酶活力收率为53．64％。Sephadex 果酸脱氢酶相对分子质量约为69000，含有2个亚基，每个亚基的相对分子质量约为34000。以制备的苹果酸脱氢酶和谷草转氨酶配成双酶反应体系，对葡萄酒中L一苹果酸的含量进行了测定；通过标准样品和葡萄酒样品精密度及回收率(93．2％～104％)实验。关键词：苹果酸脱氢酶；柱层析；纯化；L-苹果酸测定中图分类号：Q554．9 文献标识码：A Purificationand ofMalate from ApplicationDehydrogenase SwineHeartwith HighPurity SUN WANG YANG Wu’1’2 GONGRenl”， Yanl”， Jin91”，HU0Hui-zhil”， Hai-linl”，ⅥANG ofIndustrial of (1．KeyLaboratory Biotechnology，MinistryEducation，JiangnanUniversity,Wuxi214122，China； 2．Schoolof 214122，China) Biotechnology。JiangnanUniversity。Wuxi was Abstract：TheextractionofMalate Swineheart and dehydrogenase(MDH)fromdesigned tissue sulfate and optimized，bycrushing，ammoniumduel—precipitationpurificationthrough DEAE 6