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一氧化氮介导的细胞信号通路 吴玉章学院 生物技术基地班 蒋建军 0642044020 摘要：一氧化氮（NO）是一种简单的双原子气体，其在生理活动起着相当重要的作用，包括血压的调控、免疫系统调控、神经系统中学习和记忆的形成等[1]。本文就NO信号分子的发现作简要介绍，并介绍NO介导的信号途径，尤其是心血管系统中的NO信号途径及其中的一些细节，包括关键的酶如一氧化氮合酶（NOS）、溶解性鸟苷酸环化酶（sGC）、鸟苷酸依赖的蛋白激酶G（PKG）的调控方式及机制。此外，总结了NO参与的信号网络途径和NO在人体生理过程中的重要作用，并举出根据NO信号途径设计的药物及其作用机制。 关键词：一氧化氮 NOS GC cGMP PKG 简介： NO是一种极其重要的化工中间物，也可以由吸烟、汽车尾气和能源植物产生，是一种有毒的污染气体，并能破坏臭氧层、导致酸雨[2]。但是，NO是哺乳动物体内一种重要的信号分子，也是气体递质（gastransmitter）之一，其它的有CO，H2S[4,7,10]，CO和NO可以作为共递质[4]。NO在哺乳动物体内参与许多生理和病理过程。其效应既可能有利，又可能有害，需依释放量和释放部位而定。浓度水平合适的NO对于保护肝脏等器官缺血性损伤很重要。长期高浓度NO可能引发多种癌症、炎症，包括青少年糖尿病、多发性硬化、关节炎、溃疡性结肠炎。其还可以和自由基阴离子如过氧根离子（?O2-）反应形成过亚硝酸根离子（ONOO-）,损伤DNA。这样，过量的NO就可以损伤细胞。NO在活细胞中起作用的机制有几种：氧化含铁蛋白，比如核糖核苷酸还原酶、顺乌头酸酶；活化溶解性鸟苷酸环化酶(sGC)；蛋白质ADP核糖基化；蛋白质巯基亚硝基化；活化铁调控因子。NO也可以活化外周血液单核细胞的NF-κB，这是炎症反应中一个重要的转录因子。NO也是免疫系统杀伤入侵细菌的重要介质，巨噬细胞释放的NO能抑制细菌的重要生理过程，如结合并破坏关键酶的Fe-S中心，抑制DNA合成、呼吸作用。急性细菌感染中，过多的NO扩散到血管，引发血压急剧下降，带来致命的脓毒性休克。NO也可作为神经递质，控制大量的“植物性”功能，包括肠道括约肌收缩和阴茎的勃起。在脑中，NO可能与记忆的形成有关。学习和记忆的基础长时程增强（Long-term potentiation，LTP，即重复强烈刺激海马区后，突触效应持续增强）可以被抑制NO合成的药物阻断。NO担当了LTP中突触后神经元反馈信息到前膜的逆行信使的角色。 大多数信号分子都是相对较大的“惰性”生物分子，比如蛋白质、氨基酸衍生物、类固醇等，可以和靶点特异性结合。然而，NO却是一个双原子小分子，和“笑气”N2O不同（主要用于牙科麻醉），NO是最小的分子。因为NO带有自由基电子（孤对电子），因此有时以?NO表示一氧化氮。由于孤对电子的存在，其反应活性很高，半衰期只有2~30秒。其可以在溶液中自由扩散，能自由透过生物膜。这使NO成为理想的暂时性旁分泌和自分泌信号分子。此外，能和细胞蛋白的金属中心和其他细胞分子活性基团迅速反应。 NO作为信号分子的发现： 20世纪70年代晚期，Robert Furchgott试图阐明神经递质乙酰胆碱（Ach）引起的一个矛盾的实验现象: 静脉注射Ach后，血压降低，血管舒张；如果在体外直接加到血管, 效果相反。Furchgott发现血管的反应依赖于血管最内层细胞——内皮细胞层。如果有内皮细胞层，Ach使血管舒张；但是除去内皮细胞，Ach使血管收缩。Ach似乎引发了内皮细胞释放某种扩散性因子，他命名为“内皮细胞舒张因子”（endothelium-derived relaxing factor，EDRF）。与此同时，Ferid Murad 研究血管如何在硝基血管扩张剂硝基血管扩张剂硝基血管扩张剂的活性，NO synthase）由两个球状蛋白结构域通过弹性蛋白链（flexible protein strand）连接组成[9]。氧化酶结构域有一个催化中心，可以利用L-Arg、氧气和辅因子产生NO；还原酶结构域通过催化NADPH+H+脱氢并将产生的电子在两个结构域的内表面间转移，提供NO合成所需的电子。电子转移的激活是通过小的掌状钙调蛋白（CaM）结合到序列特异性弹性蛋白链实现的。 人体存在有3种NOS，即脑细胞NOS（或神经细胞NOS，nNOS）、内皮细胞NOS（eNOS）和诱导型NOS（iNOS）。nNOS和eNOS是组成型的，iNOS可以根据系统的NO需求而开关。增加细胞内Ca2+浓度可以激活nNOS和eNOS；免疫系统激活后，iNOS在许多细胞中产生，对抗细菌感染和其他环境因素，其不受Ca2+调控。对于nNOS和eNOS，钙调蛋白只有在高浓度Ca2+存在的条件下才结合。这样就形成了一个依