药学专业体内药分作业.doc

体内药物分析作业 分析方法建立后需进行包括准确度、精密度等一系列的评价项目进行验证。请问：对所建立的药物体外及体内分析方法，其验证要求有何不同，为什么？举2文献说明，标明文献出处。 评价一个体内药物分析方法的优劣主要有以下几个指标：精密度、准确度、灵敏度、专属性或选择性、可测浓度范围、测定所需时间以及对生物样品的适应性(分析方法要模拟生物样品在预处理或储存容器中的状态，是生物样品保持稳定性)等。 由于体液中的药物含量通常很低，且样品量往往一定，同时一些内源性杂质和药物代谢产物会干扰分析，故对分析方法验证要求灵敏度更高，选择性（分离杂质能力强）更好，还应与生物样品相适应，保持样品稳定性。 例一 《高效液相色谱法测定石杉碱甲微球在大鼠体内的血药浓度及药物残留量》（符旭东，平其能，高永良，中国药科大学药剂教研室,2003—12—10) 本文首先用碱化后有机溶剂提取的方法处理样本,然后采用乙腈和含0．2％的三乙胺水溶液作为流动相的主要组成，通过调节二者的比例，可在排除内源性物质干扰的前提下，尽量地缩短保留时间提高检测的灵敏度。本文曾比较三氯甲烷和乙酸乙酯的提取效果，结果表明用三氯甲烷提取血浆样本，可在满足提取回收率大于70％的前提下，减少内源性物质的萃取。而用乙酸乙酯提取肌肉匀浆液样本，可获得更高和更稳定的提取回收率。 结果：血浆样品测定的线性范围为2．5～500μg/L，最低定量浓度为2．5μg/L。。肌肉匀浆液样本测定的线性范围为1．008～ 201．6 mg/L，最低定量浓度为1．008 mg/L。两种方法的相对回收率均在85％～115％范围内。RSD小于12％。 与另一篇文献中，体外检测药物含量相比，便可说明体内药物分析的高灵敏性和高选择性。如：《石杉碱甲注射用缓释微球制备方法的比较及其体内外评价》(潘峰，陈庆华怫，包泳初，朱大元，蒋山好,上海医药工业研究院)中，检测石杉碱的含量，便为体外为普通的药物检测。 例二 《苄片人体药动学及生物利用度》(王珍，金锐，于景翠，杜智敏，哈尔滨医科大学第二临床医学院临床药学药物研究所，黑龙江省高校重点实验室，黑龙江哈尔滨150081) 研究头孢氨苄片在健康人体内的血药浓度经时过程及人体生物利用度。方法采用HPLC法测定20名健康受试者单剂量1：3服19头孢氨苄片受试制剂及参比制剂后的药动学数据。 经过血浆样品处理，血浆标准曲线的制备，回收率与精密度试验等 血浆中头孢氨苄的最低检出浓度为0．5mg／L，回收率及日内、日间 变异系数等，均符合生物等效性试验的要求 《HPLC法测定头孢氨苄甲氧苄啶胶囊含量的方法改进》(韩志云，朱迎春江苏省淮安药品检验所淮安2230001)以HPLC法同时测定复方头孢氨苄甲氧苄啶 胶tt中头孢氨苄与甲氧苄啶的含量。方法 以o．02mol/L一磷酸溶液(用20％氢氧化钠调节pH值至3-5±o．05)-乙腈(85：15)为流动相，检测波长为235nm。结果 头孢氨苄在10．00～90．00μg/mL、甲氧苄啶在2．00～18-00μg/mL范围内，峰面积与其浓度呈良好线性关系；头孢氨苄平均回收率为100%、RSD为0．15 ；甲氧苄啶平均回收率为100．1% 、RSD为0．19. 2．3 1的HPLC法含量测定 色谱条件：色谱柱Cl B柱(4．6 mmx250 mm， 5}am)；流动相甲醇．0．08 mol／L乙酸铵缓冲液 (pH 6．O)(50：50)；检测波长3 10 nm；流速 1．0ml／min；柱温40℃；进样量20 ul。 测定方法：精密称取l微球25 mg置lO ml量 瓶中，加乙腈2 IIll，涡旋至溶解，用甲醇定容，摇匀。 经0．45岬尼龙滤膜过滤，滤液以流动相稀释10倍， 经离心(17 000xg)10 min后，取上清液进样测定。 标准曲线和方法学研究：精密称取1原药适 量，用甲醇制得浓度分别为1．25、2．5、5、10、 20 Ltg／ml的标准溶液，进样测定，以峰面积(A) 对l浓度(C)线性回归，得回归方程为A=5．1× 105c一3．8×103，r=0．999 9。高、中、低浓度样品的 绝对回收率分别为(99．94-1．04)％，(100．0士0．02)％， (99．3士0．26)％(珂=3)；日内月肋分别为0．7l％、 0．9l％、2．66％(n=5)；日间尺．∞分别为1．51％、 O．76％、2．74％(，产5)。 2．4微球体外释药 精密称取1微球50 mg置具塞玻璃瓶中，加入 释放介质[pH 7．4磷酸盐缓冲液(PBS)，含NaN，、 吐温-80、吐温一20各0．02％]100 ml，于37℃水 浴振荡(110 r／min)中进行释放试验。分别于d1、 3、5、7、10、14、1 6取样l m1，并补充同温等量 释放介质，离心(1