6种不同加样量对酶联免疫吸附测定法检测乙型肝炎病毒核心抗体结果的影响 柳洪艳.docVIP

精品论文 参考文献 6种不同加样量对酶联免疫吸附测定法检测乙型肝炎病毒核心抗体结果的影响 柳洪艳 柳洪艳 　　湘阴县人民医院检验科 湖南岳阳 410500 　　【摘 要】目的：分析及探索不同加样量对酶联免疫吸附测定法检测乙型肝炎病毒核心抗体（HBcAb）结果的影响。方法：收集2010年10月~2015年10月间我院接诊的经临床检查确诊的乙型肝炎患者的HBcAb阳性标本3000例作为研究对象，另选同期于我院进行健康体检的健康体检人群的HBcAb阴性标本（均经临床检查排除其它相关感染性疾病）3000例进行对照研究。两组标本均分别采用A~G等5种不同的加样方式进行加样，其中A加样方式为遵循操作说明书按1：30的比例对待测血清进行稀释，B~G加样方式则分别给予10mu;L、20mu;L、30mu;L、40mu;L、50mu;L的血清加入，然后再通过酶联免疫吸附测定法对不同加样量标本进行HBcAb检测，并对检测结果进行观察和记录。结果：本组收集的3000例HBcAb阳性标本中不同加样方式的检测结果均显示为阳性，均无假阴性。而3000例HBcAb阴性标本中，A加样方式和B加样方式的阳性率对比（P＞0.05）。而与A加样方式相比，C加样方式、D加样方式、E加样方式及F加样方式的检测阳性率均明显更高（P＜0.05）。结论：临床采用酶联免疫吸附测定法对大量标本的HBcAb进行检测时，可选用10mu;L血清样本直接加入，从而有效提高检测效率。 　　【关键词】肝炎；乙型肝炎病毒核心抗体；加样量；酶联免疫吸附测定法；结果 　　酶联免疫吸附测定法是现今临床上常用的乙型肝炎病毒核心抗体（HBcAb）检测方法，但临床经验表明，其初检与复检的诊断符合率往往不够理想，据分析这不仅和使用的检测方法有关，加样量的区别也会对检测结果造成明显的影响[1~2]。传统临床常用的加样量为按1：30的比例对待测血清进行稀释，这样不仅操作比较复杂，并且还易受到多方面人为因素的影响[3]，因此选取合理的加样量显得尤为重要。为了分析不同加样量对酶联免疫吸附测定法检测结果的影响，本研究收集2010年10月~2015年10月间我院接诊的经临床检查确诊的乙型肝炎患者的HBcAb阳性标本3000例与健康体检人群的HBcAb阴性标本300例进行临床研究，分别给予不同的加样量进行检测，现总结报道如下： 　　1 材料和方法 　　1.1 材料 　　收集2010年10月~2015年10月间我院接诊的经临床检查确诊的乙型肝炎患者的HBcAb阳性标本3000例作为研究对象，另选同期于我院进行健康体检的健康体检人群的HBcAb阴性标本（均经临床检查排除其它相关感染性疾病）3000例进行对照研究。 　　1.2 研究方法 　　1.2.1 仪器及试剂 　　仪器选用RT6100C酶标仪（深圳雷杜公司生产）与UVW2000洗板机（华科瑞公司生产），HBcAb检测试剂盒由上海科华生物工程股份有限公司提供。 　　1.2.2 检测方法 　　收集两组待测标本，均均分别采用A~G等5种不同的加样方式进行加样，其中A加样方式为遵循操作说明书按1：30的比例对待测血清进行稀释，B~G加样方式则分别给予10mu;L、20mu;L、30mu;L、40mu;L、50mu;L的血清加入。每板次均进行阳性、阴性对照，且做好室内质控，室内质控数据在控。再采用酶联免疫吸附测定法[4]进行检测，注意相关检测操作及结果判定均严格按照试剂盒说明书进行。 　　1.3 统计学分析 　　对本研究所得数据进行详细记录并构建数据库，以统计学软件SPSS20.0进行处理和分析，对计数资料采用x2比较进行分析，单位以率（%）表示，当显示Plt;0.05时，则提示在比较方面差异显著，存在统计学意义。 　　2 结果 　　检测结果显示，本组收集的3000例HBcAb阳性标本中不同加样方式的检测结果均显示为阳性，均无假阴性。而在本组收集的3000例HBcAb阴性标本中，A加样方式和B加样方式的阳性率对比，（P＞0.05）差异均无统计学意义。而与A加样方式相比，C加样方式、D加样方式、E加样方式及F加样方式的检测阳性率均明显更高，（P＜0.05）差异均有统计学意义。 　　 　　3 讨论 　　近年来，随着人们物质文化生活水平的不断提高，慢性乙型肝炎的发病率亦呈逐年上升趋势，对人们的身体健康和生活质量造成了非常严重的影响。该疾病主要是因乙型肝炎病毒感染（HBV）所致，相关资料报道显示，全世界约有近3.5亿人感染该病毒，其中我国感染HBV患者占人口总数的1/3左右[5]。而乙型肝炎病毒核心抗体（HBcAb）则是临床检查及评估HBV感染患者传染性和预后的重要指标，通常情况下其在乙肝表面抗原HBsAg出现后至患者肝炎症状出现前可在患者的血清中检出，HBcAb阳性即代表患者