基于辣根过氧化物酶放大的丝网印刷电极DNA传感器.pdfVIP

第 32卷 第 5期 青 岛 科 技 大 学 学 报(自然科学版) Vo1．32No．5 2011年 1O月 JournalofQingdaoUniversityofScienceandTechno1ogy(Natura1ScienceEdition) Oct．2011 文章编号：1672—6987(2011)05—0478—05 基于辣根过氧化物酶放大的丝网 印刷电极 DNA传感器 邹元明。冷翠翠，万 钧 (青岛科技大学 化学与分子工程学院，山东 青岛266042) 摘 要：以聚苯胺纳米管、壳聚糖、室温离子液体修饰的丝网印刷电极为基底 电极，以辣 根过氧化物酶 (HRP)催化的HzO。氧化邻苯二胺 (OPD)的反应作为信号放大手段 ，构建 了一个酶放大丝网印刷 DNA传感器。考察并确定 了在修饰丝网印刷 电极上 ，上述反应 的最优条件及进行电化学测定的最优条件 ：HRP催化 OPD与 HO。反应的最佳缓冲液为 pH 5．0的醋酸一醋酸钠缓冲液；最佳检测支持 电解质为 PH7．2的PBS缓冲液 。HRP催 化 OPD与双氧水反应 的最佳反应条件 ：使用 l6mmoI．L 双氧水和 30mmoI．L OPD反应 15min。在该传感器上，在最优条件下，DNA测定 的线性范 围为 2×10 mol·L-1到 8×10 。mo1．L_。，回归方程为Ai一0。3086+0．0160CT。通过 3a规则计算 出的DNA检测限为8×10 moI．L_。。该传感器在 DNA检测方面具有 良好的选择性。 关键词：修饰丝网印刷电极；辣根过氧化物酶；邻苯二胺 ；DNA传感器 中图分类号：0657．1：Q 523 文献标志码 ：A A Screen—printedElectrodeDNA SensorBasedonHorseradish Peroxidase。catalysedAmplification ZOU Yuan—ming，LENG Cui-cui，WANJun (CollegeofChemistryandMolecularEngineering，QingdaoUniversityofScienceandTechnology，Qingdao266042，China) Abstract：Inthisstudy，aDNA sensorwasconstructedbasedonthescreen～printedelec— trodethatwasmodifiedwithpolyanilinenanotubes，chitosanandroom—temperatureion— icliquids，andby usingthehorseradish peroxidasecatalyzedoxidationofH2O2too— phenenyldiamine(OPD)asthesignalamplification approach．Theoptimalconditions fortheabove-mentionedreactionandfortheelectrochemica1determinationonthemodi— fledscreen—printed electrodewereestablished asfollows：theoptimalbufferforthe HRP—catalyzedoxidationofOPD byH2O2wasHOAc—NaOAcatpH 5．0；theoptimal bufferfortheelectrochemicaldeterminationwasPBSatpH 7．2；thebestworkingcon— ditionforHRP-catalyzedoxidationwasatareactiontimeof15minwith 16mmo1·L一 H202and30mmol·L_。OPD．Undertheseoptimalconditions，DNA canbedetermined inal