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天麻素和天麻多糖与天麻商品级别的关系评价
精品论文 参考文献
天麻素和天麻多糖与天麻商品级别的关系评价
祁东县中医医院 湖南祁东 421600
【摘 要】目的 对天麻素和天麻多糖与天麻商品级别的关系评价方法的分析和探讨。方法:将九份不同商品级别的天麻分别使用HPLC 法和苯酚-硫酸法测定其中天麻素和天麻多糖的含量,比较天麻素和天麻多糖与天麻商品级别的关系。结果:不同商品级别的天麻素的含量相接近,一、二、三等天麻中天麻素的量分别为 0.47%、0.41%和 0.45%;而天麻多糖含量不同,一等(31.56%)gt;二等天麻(24.03%)gt;三等(19.89%)。结论:天麻素在不同等级的天麻中几乎无差异,而天麻天麻多糖可用于鉴别天麻质量优劣。
【关键词】天麻素;天麻多糖;天麻商品级别
天麻是兰科植物天麻Gastrodia elata Bl.的干燥块茎,为常用的中药材,其功效为平肝熄风、通络止痛等[1]。从大量的前期工作发现[2],天麻素不能很恰当的评价天麻药材的等级。所以本研究通过9份不同等级样品中天麻素和天麻多糖的含量,分析天麻不同商品等级与天麻多糖和天麻素的含量的关系,以下是详细报道。
1 仪器与试药
1.1 仪器
优普超纯水制造系统-------------------------四川优普超纯科技有限公司Agilent 1200 型HPLC------------------------------------------------------------美国UV-1100 型紫外可见分光光度计-------------------上海天美科学仪器有限公司DKZ 型电热恒温振荡水浴槽-----------------------成都鑫益仪器有限公司SF-TDL-5C 型离心机-------------------------上海菲恰尔分析仪器有限公司BSA224S 型电子天平---------------------------------北京赛多利斯科学仪器有限公司
1.2 药品及试剂[3]
天麻素对照品和D-无水葡萄糖对照品购买于中国食品药品检定研究院;乙腈为色谱纯。
2 方法
2.1 HPLC法测定天麻素的含量
2.1.1 对照品溶液的制备
精密称取天麻素对照品10.05 mg于25 mL量瓶中;加乙腈-水(3∶97)溶解并定容至刻度,摇匀,得到对照品溶液备用。
2.1.2 供试品溶液的制备
精密称取2.0g天麻粉末(过三号筛),用50%乙醇回流提取三次,每次1.0小时,冷却,过滤,浓缩得浸膏。取10mg,用乙腈-水(3∶97)溶解,定容与25 mL量瓶中,摇匀。用0.22mu;m 微孔滤膜过滤得供试品溶液备用。
2.1.3 色谱条件
色谱柱:Alltima C18(250 mmtimes;4.6 mm,5 mu;m);流动相为乙腈:0.05%磷酸溶液=3∶97;柱温 35 ℃;体积流量 1.0mL/min;检测波长 220 nm;进样量10mu;L。
2.1.4 线性关系的考察
精密取天麻素对照品溶液 0.1、0.25、0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0mL 于10 mL量瓶中,加乙腈-水(3∶97)定容至刻度,摇匀;用0.22 mu;m 微孔滤膜过滤得不同浓度对照品溶液。分别以Y轴的峰面积对X轴的进样量进行线性回归,得回归方程为Y=1766.1 X-5.828,(r=0.9999)。线性范围:0.040~3.22 mu;g/ml。
2.1.5天麻素的测定
按“2.1.2”方法配成供试品溶液,和在“2.1.3”项色谱条件测定天麻素含量
2.2 苯酚-硫酸法测定天麻多糖的含量
2.2.1 葡萄糖对照品溶液的制备
精密称取 25.12 mgD-无水葡萄糖对照品与25 mL 量瓶中,加蒸馏水溶解,定容至刻度,摇匀,得葡萄糖对照品溶液。分别量取该溶液 0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8 mL 于10 mL量瓶中,加蒸馏水定容至刻度,摇匀。再分别取1.0 mL葡萄糖溶液于具塞试管中,加1.0 mL5%苯酚溶液,摇匀;再加入4.5 mL浓硫酸 与恒温水浴进行显色反应10分钟,于冰水浴冷却5分钟,得葡萄糖对照品溶液。
2.2.2 空白溶液的制备
精密取蒸馏水1.0 mL于具塞试管中,按照“2.2.1”项下的方法,制得空白溶液。
2.2.3 葡萄糖对照品溶液的线性范围
以空白溶液为背景,在 488 nm波长分别测定上述葡萄糖对照品溶液的吸光度值。以A(吸光度)对C(浓度)进行线性回归,得回归方程:A=11.471 C+0.0142,r=0.998,线性范围:0
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